[发明专利]一种液态发酵处理万古霉素发酵废渣的方法

说明书

技术领域

本发明属于发酵废渣处理和酵母培养领域，具体地说，是关于一种通过酵母液态发酵处理万古霉素发酵废渣的方法。

背景技术

万古霉素是一种糖肽类抗生素，是目前临床上用于治疗由甲氧西林耐药金葡球菌引起的严重感染疾病的首选药物，现大多采用微生物发酵培养的方式进行生产。

万古霉素发酵结束后，发酵液经过一定的预处理，滤去有用的清液后，在剩下的发酵废渣中，主要成分有万古霉素产生菌的菌丝体、原培养基中未代谢利用完的有机物、无机盐和少量万古霉素等；其特点是富含有机物和菌体蛋白，同时还含有一定量的万古霉素残留。

现在，对抗生素废渣的常规处理方法主要有以下二种：一是把废渣当作废弃物直接排放；二是将废渣煅烧。但是，方法一会对环境造成严重的污染，并直接或间接地危害到人畜健康；方法二成本高、有污染，且浪费严重。因此，对万古霉素生产企业而言，如何对发酵废渣的进行有效的、低成本的无害化处理是一个亟待解决的问题。

利用酵母菌对抗生素发酵废渣进行再利用以获得菌体蛋白的方法在现有技术中已有报道，例如无锡轻工大学生物工程学院等的文献(粮食与饲料工业，第10期，30-31页，1999)报道了利用酵母菌对井冈霉素进行固态发酵以获得菌体蛋白，阮南等的文献(河北工业科技，第23卷第2期，79-81页，2006)中报道了利用酵母菌对青霉菌渣进行固体发酵以获得菌体蛋白。但这些方法都需要在固态发酵的培养基(废渣)中额外加入培养酵母菌所需的营养成分，因此虽然对发酵废渣作了处理，但成本仍然较高。

发明内容

本发明的目的就在于解决现有万古霉素发酵废渣处理方法所存在的上述缺陷，从而提供一种新型的万古霉素发酵废渣处理方法。

为实现上述目的，本发明利用酵母菌以液态发酵的方式对万古霉素发酵废渣进行处理，所述液态发酵以万古霉素发酵废渣作为唯一的培养基。

根据本发明，所述培养基的万古霉素废渣含量为1％-20％(废渣干重与液体培养基体积之比)，优选的是3％-13％。

根据本发明，液态发酵的温度范围为20～40℃，优选的是26～32℃。

根据本发明，取决于所使用的酵母菌的不同，液态发酵的时间通常为10小时～7天。

根据本发明，用于万古霉素发酵废渣处理的酵母菌包括地霉属、红酵母属、内真菌属，假丝酵母属、固囊酵母属、德巴利酵母属、以及汉逊酵母属的酵母菌。具体地，这些酵母菌选自：白地霉(Geotrichum candidum)，深红酵母(Rhodotorula rubra)，粘红酵母(Rhodotorula glutinis)，克鲁斯假丝酵母(Candida krusei)，热带假丝酵母(Candida tropicalis)，产朊假丝酵母(Candida utilis)，固囊酵母(Citeromyces matritensis)，汉逊德巴利酵母(Debaryomyces hansenii)，亚膜汉逊酵母(Hansenulasubpelliculosa)，以及扣囊复膜孢酵母(Saccharomycopsis fibuligera)。

根据本发明，经过液态发酵培养后，以离心或过滤方式收集得到的发酵产物再经干燥粉碎，便可得到酵母培养物干粉。经检测，所获得的干粉中不含万古霉素残留。

本发明利用万古霉素发酵废渣作为唯一的培养基培养酵母菌，不仅解决了万古霉素发酵废渣中万古霉素残留的问题，实现了无害化处理，同时还能有效利用万古霉素发酵废渣，获得大量有应用价值的酵母蛋白。

附图说明

图1显示了白地霉(实施例12)分别在液态发酵0小时(A)、24小时(B)和120小时(C)时万古霉素菌丝体消解的情况。

图2显示了固囊酵母分别在液态发酵0小时(A)、24小时(B)和120小时(C)时万古霉素菌丝体消解的情况。

图3为未经酵母固态发酵处理的发酵废渣样品(A)以及经白地霉液态发酵处理得到的培养物干粉(B)的HPLC分析图谱，显示经过处理后的干粉中不含万古霉素残留。

具体实施方式

以下结合具体实施例，对本发明作进一步说明。应理解，以下实施例仅用于说明本发明而非用于限定本发明的范围。

实施例1、酵母菌种子液的获得

按以下配方配制种子培养基：

麦芽浸粉8.0％；酵母粉0.1％；K₂HPO₄ 0.1％；尿素0.1％；其余成分为水；pH6.0。