[发明专利]一种生产5’－呈味核苷酸的方法无效
| 申请号： | 200710038635.0 | 申请日： | 2007-03-29 |
| 公开（公告）号： | CN101063126A | 公开（公告）日： | 2007-10-31 |
| 发明（设计）人： | 梁胜华 | 申请（专利权）人： | 复旦大学 |
| 主分类号： | C12N15/09 | 分类号： | C12N15/09;C12N9/12;C12P19/30 |
| 代理公司： | 上海正旦专利代理有限公司 | 代理人： | 陆飞;盛志范 |
| 地址： | 20043*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 生产 核苷酸 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种生产5’-呈味核苷酸的方法，其特征在于包括如下步骤：
1.1利用重组DNA技术，构建酸性磷酸酶表达载体，并转化大肠杆菌，得到高效表达酸性磷酸酶的基因工程菌；所述的酸性磷酸酶来源于产气肠杆菌，其核苷酸序列为SEQ.ID.NO.1，氨基酸序列为SEQ.ID.NO.2；
1.2酸性磷酸酶基因的突变与筛选对核苷具有较高亲和性的酸性磷酸酶；该突变型酸性磷酸酶的核苷酸序列为SEQ.ID.NO.3，氨基酸序列为SEQ.ID.NO.4；
1.3以对核苷具有较高亲和性的酸性磷酸酶催化核苷与磷酸基团供体合成5’-呈味核苷酸；
其中，所述的核苷为肌苷，所述的磷酸基团供体为焦磷酸盐。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤1.3中反应温度为20-50℃，缓冲液的pH值为2.5-6，反应底物中核苷浓度为10-200mM，磷酸基团供体浓度为核苷浓度的1-10倍，反应时间为1-20小时。
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