[发明专利]一种两次bio－bar－code核酸检测技术无效
| 申请号： | 200710038929.3 | 申请日： | 2007-03-30 |
| 公开（公告）号： | CN101078028A | 公开（公告）日： | 2007-11-28 |
| 发明（设计）人： | 贺明星;李凯;肖君华;周宇荀 | 申请（专利权）人： | 东华大学 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68 |
| 代理公司： | 上海泰能知识产权代理事务所 | 代理人： | 黄志达;谢文凯 |
| 地址： | 201620上海市松*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 两次 bio bar code 核酸 检测 技术 | ||
1.一种两次bio-bar-code核酸检测方法，包括如下步骤：
(1)磁珠探针、待测DNA和第一组纳米金探针混合，杂交；
(2)分离磁珠，洗涤，加洗脱液，继续保温杂交，磁分离，洗涤；
(3)重新悬浮沉淀，加入第二组纳米金探针，混合，杂交；
(4)分离磁珠，洗涤，加洗脱液，去磁珠，检测上清液；
所述磁珠探针长度为30～50个碱基，分为两个部分，生物素修饰的一端与磁珠连接，这部分序列为随机序列，不与其它探针以及待检的靶序列互补，非生物素修饰的一端与待检的靶序列的一端互补；纳米金探针共有两组，第一组纳米金探针的一端为巯基修饰，该部分碱基能与磁珠的非生物素修饰端互补，而非巯基修饰端则与待检靶序列互补；第二组纳米金探针一端为巯基修饰，一端为荧光修饰，巯基修饰端为随机序列，不与其它探针以及待检的靶序列互补，而荧光修饰端与第一组探针的非巯基修饰端互补。
2.根据权利要求1所述的一种两次bio-bar-code核酸检测方法，其特征在于：所述的磁珠颗粒大小是0.5～1.5μm，纳米金颗粒大小是30nm，待测DNA浓度是10fm-100pm。
3.根据权利要求1所述的一种两次bio-bar-code核酸检测方法，其特征在于：所述的杂交温度是30-55℃，时间是5-60分钟。
4.根据权利要求3所述的一种两次bio-bar-code核酸检测方法，其特征在于：所述的杂交温度是55℃，时间是15分钟。
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