[发明专利]蝎毒素基因转化的杀虫真菌工程菌株及应用

权利要求书

1.一种编码北非蝎神经毒素多肽AaIT的多核苷酸，其特征在于，所述的多核苷酸的序列选自下组：

(a)具有SEQ ID NO：1中第163-375位所示的核苷酸序列；

(b)具有SEQ ID NO：1中第106-375位所示的核苷酸序列；

(c)具有SEQ ID NO：1中第1-375位所示的核苷酸序列；或

(d)与SEQ ID NO：1中第163-375位有至少95％相同性，且编码SEQ ID NO：2中20-89位所示氨基酸序列的核苷酸序列，并且所述的多核苷酸序列可在真菌中表达。

2.权利要求1所述的多核苷酸的用途，其特征在于，用于制备防治昆虫的制剂。

3.一种昆虫血腔特异表达启动子，其特征在于，所述的启动子选自下组：

(1)具有SEQ ID NO：3所示的核苷酸序列的多核苷酸；

(2)在严格条件下能够与(1)限定的多核苷酸序列杂交且具有指导目的基因在昆虫血腔中特异性表达功能的多核苷酸；或

(3)与SEQ ID NO：3所示的核苷酸序列具有95％以上同源性且具有指导目的基因在昆虫血腔中特异性表达功能的多核苷酸。

4.权利要求3所述的启动子的用途，其特征在于，所述的启动子用于指导目的基因在昆虫血腔中特异性表达。

5.一种构建物，其特征在于，所述的构建物从5’至3’依次含有以下元件：

权利要求3所述的启动子；和

目的基因。

6.如权利要求5所述的构建物，其特征在于，在启动子和目的基因之间，还包含：核糖体翻译识别元件，和/或信号肽编码元件。

7.如权利要求5或6所述的构建物，其特征在于，

所述的目的基因是昆虫毒素多肽的编码元件；

所述的核糖体翻译识别元件具有SEQ ID NO：1中第9-105位的核苷酸序列；

所述的信号肽具有SEQ ID NO：2中1-19位所示的氨基酸序列。

8.如权利要求7所述的构建物，其特征在于，所述的昆虫毒素多肽的编码元件为北非蝎神经毒素多肽AaIT的编码元件。

9.如权利要求8所述的构建物，其特征在于，所述的北非蝎神经毒素多肽AaIT的编码元件选自下组：

(i)具有SEQ ID NO：1中第163-375位所示的核苷酸序列；

(ii)与SEQ ID NO：1中第163-375位有至少95％相同性，且编码SEQ ID NO：2中20-89位所示氨基酸序列的核苷酸序列，并且所述的多核苷酸序列可在真菌中表达。

10.一种载体，其特征在于，所述的载体含有权利要求1所述的多核苷酸或权利要求5所述的构建物。

11.一种细胞，其特征在于，所述的细胞：

含有权利要求10所述的载体；或

其基因组中整合有外源的权利要求1所述的多核苷酸或权利要求5所述的构建物。

12.如权利要求11所述的细胞，其特征在于，所述的细胞是重组真菌细胞。

13.一种孢子，其特征在于，所述的孢子由权利要求12所述的真菌细胞产生。

14.一种防治昆虫的制剂，其特征在于，所述的制剂含有(a)权利要求12所述的细胞和/或权利要求13所述的孢子；以及(b)农药学上可接受的载体。

15.一种防治昆虫的方法，其特征在于，所述方法包括：给予需要防治昆虫的对象或场所施用权利要求13所述的孢子。

16.一种载体，其特征在于，所述的载体含有权利要求3所述的昆虫血腔特异表达启动子，作为启动子元件。