[发明专利]嘌呤类药物敏感基因检测试剂盒

说明书

技术领域

本发明属于临床检测的基因芯片技术领域，具体地说涉及一种嘌呤类药物敏感基因检测 试剂盒。

背景技术

目前研究结果表明，治疗急性淋巴细胞白血病的巯嘌呤代谢药物——6-巯基嘌呤和6-巯代 鸟嘌呤均是无内在生物活性的药物，必须通过体内一系列代谢后才能发挥药效。而人体的巯基 嘌呤甲基转移酶(TPMT)的代谢酶在此类药物代谢和抗白血病作用中起关键作用。TPMT上含 有的突变位点与人体对嘌呤类药物的敏感性有关。

目前用于检测5氟尿嘧啶单位点突变的方法主要有：测序法，这是最直接，最准确的方 法，；荧光定量PCR法，和单碱基延伸法。这些方法所需要的设备仪器都价格昂贵，技术复杂， 从经济上考虑不适于用作常规方法加以推广。

发明内容

为了对嘌呤类药物敏感的相关基因进行平行检测，对大量样本进行同时分析，并考虑经 济推广的可行性，本发明选择TPMT的三个突变位点作为检测对象，提供一种嘌呤类药物敏 感基因芯片检测试剂盒，包括抽提液、杂交缓冲液、洗液、扩增液、Taq酶、基因芯片；其 特征在于，所含的扩增液含有扩增巯基嘌呤甲基转移酶(TPMT)基因上3个突变位点序列的引 物，3个突变位点分别是238，460和719。

所述的嘌呤类药物敏感基因检测试剂盒，其特征在于，扩增液可以包含以下一组序列的 引物：

238-1：TGAAACCCTATGAACCTG

238-2：TCCAGGAATTTCGGTGT

460-1：GTTGAAGTACCAGCATG

460-2：CCTGGATTGATGGCAA

719-1：GGTTGATGCTTTTGAAGAA

719-2：CAATCTGCAAGACACATAG

所述的嘌呤类药物敏感基因芯片检测试剂盒，其特征在于，还可以包括扩增液B，扩增 液B中包含如下一组序列的ASPE(Allele-Specific Primer Extension，即等位基因特特性引物 延伸)引物：

238-G：5’-ATTTTATGCAGGTTTG

238-C：5’-ATTTTATGCAGGTTTC

460-G：5’-GGATAGAGGAG

460-A：5’-GGGATAGAGGAA

719-A：5’-TCTTTTTGAAAAGTTATA

719-G：5’-TCTTTTTGAAAAGTTATG

所述的嘌呤类药物敏感基因芯片检测试剂盒，其特征在于，扩增液B中包含的ASPE引 物还可以是含有5’-端检测定位序列的如下序列：

238-G：5’-CAATTCATTTCATTCACAATCAATTTTATGCAGGTTTG

238-C：5’-CAATATACCAATATCATCATTTATTTTATGCAGGTTTC

460-G：5’-TCAATCATCTTTATACTTCACATGGGATAGAGGAG

460-A：5’-CTTTTTCAATCACTTTCAATATTTGGGATAGAGGAA

719-A：5’-CAATTTACTCATATACATCACTTTCTTTTTGAAAAGTTATA

719-G：5’-CTACTAATTCATTAACATTACTATCTTTTTGAAAAGTTATG

所述的嘌呤类药物敏感基因芯片检测试剂盒，其特征在于，扩增液B含有生物素标记的 dCTP。

所述的嘌呤类药物敏感基因芯片检测试剂盒，其特征在于，所含的基因芯片上的探针序 列可以是以下一组序列：

POS-1：ATTGATTGTGAATGAAATGAATTG

POS-2：GTAAATGATGATATTGGTATATTG

POS-3：ATTGTGAAGTATAAAGATGATTGA

POS-4：ATGAATTGAAAGTGATTGAAAAAG

POS-5：AAAGTGATGTATATGAGTAAATTG

POS-6：GTAGTAATGTTAATGAATTAGTAG