[发明专利]蛇目白尼参中的一种皂苷类抗肿瘤化合物

说明书

技术领域

本发明涉及医药技术领域，是从海洋动物蛇目白尼参中分离到的皂苷类新的抗肿瘤化合物Arguside B和C。

背景技术

蛇目白尼参(Bohadschia argus Jaeger)是一种大量生长于我国南海海域的海参纲动物，属海参科白尼参属。体长一般40～50cm，宽约10cm，体呈圆筒状。背面有许多蛇目状斑纹，排列为不规则的纵行。蛇目白尼参是一种大形食用海参。有关所含的皂苷类成分的化学结构及抗肿瘤活性迄今尚未见有过报道。

发明内容

本发明提供一种从生长于中国海南省南海海域的蛇目白尼参中提取分离到的新的皂苷类化合物，分别命名为Arguside B和Arguside C，它们的化学结构式通式如下：

其中R₁表示OH或H

R₂表示CH₃或CH₂OH

当R₁为OH R₂为CH₃时，化合物为Arguside B

当R₁为H R₂为CH₂OH时，化合物为Arguside C

本发明化合物的制备方法如下：

(1)制备总皂苷提取物：将蛇目白尼参干品粉碎，按常规用50％～90％乙醇浸泡提取，浓缩提取液，得到流浸膏。将流浸膏均匀分散于水中，依次用石油醚、水饱和正丁醇分别萃取。将正丁醇萃取液浓缩至干，得总皂苷提取物。

(2)分离纯化：上述总皂苷提取物进行硅胶柱层析，以氯仿∶甲醇∶水＝8～6.5∶2～3.5∶1混合溶剂洗脱，根据薄层层析检测，收集含有皂苷的流分，再进行C₁₈反相柱层析，以甲醇：水为9～7:1～3进行梯度洗脱，根据薄层层析检测，分别收集Arguside B和C流份，浓缩至干得Arguside B和C。经多种现代光谱分析，特别是综合应用多种先进的二维核磁共振波谱的解析，确定了这两种化合物的化学结构和立体构型。

1.Arguside B为无色结晶性粉末，熔点220-222℃，分子式C₆₇H₁₁₀O₃₃；Liebermann-Burchard反应和α-萘酚反应阳性。电喷雾阳离子质谱ESI-MS⁺m/z：1465[M+Na]⁺；电喷雾阴离子质谱ESI-MS^-m/z：1441[M-H]^-。IR(KBr)cm^-1：3410(羟基)，1765(酯羰基)，1625(双键)，1235(酯键)，1074。¹³C NMR与¹HNMR数据见表1和表2。以15％HCl水解皂苷后得到组成皂苷糖链的单糖，将其制备成糖腈乙酸酯衍生物，进行气相色谱-质谱联用分析，经与标准糖的糖腈乙酸酯衍生物对照，确定Arguside A的糖链由木糖、奎诺糖、葡萄糖、3-O-甲基葡萄糖组成，比例为1:1:2:2。核磁共振氢谱和碳谱数据见表1和表2。

2.Arguside C为无色结晶性粉末，熔点221-223℃，分子式C₆₇H₁₁₀O₃₃；Liebermann-Burchard反应和α-萘酚反应阳性。电喷雾阳离子质谱ESI-MS⁺m/z：1465[M+Na]⁺；电喷雾阴离子质谱ESI-MS^-m/z：1441[M-H]^-。IR(KBr)cm^-1：3422(羟基)，1760(酯羰基)，1623(双键)，1078。¹³C NMR与¹H NMR数据见表3和表4。以15％HCl水解皂苷后得到组成皂苷糖链的单糖，将其制备成糖腈乙酸酯衍生物，进行气相色谱-质谱联用分析，经与标准糖的糖腈乙酸酯衍生物对照，确定Arguside B的糖链由木糖、葡萄糖、3-O-甲基葡萄糖组成，比例为1:3:2。核磁共振氢谱和碳谱数据见表3和表4。

表1.Arguside B苷元部分的¹³C NMR与¹H NMR数据

表2.Arguside B糖链部分的¹³C NMR与¹H NMR数据