[发明专利]水痘减毒活疫苗

权利要求书

1.一种水痘减毒活疫苗，按如下方法制备而成：

(1)将MRC-5细胞在细胞瓶中连续传代不超过33代；

(2)至细胞生长至一定规模后，将毒种接种至细胞中，进行两次连续感染，M.O.I分别为0.001～0.002和0.01～0.03；

(3)加入含2～3％胎牛血清的MEM培养液，置于35～37℃培养；

(4)当MRC-5细胞病变程度达到++～+++时，倒去培养液，以PBS洗液洗涤细胞表面，洗去牛血清；

(5)加入0.05％的EDTA溶液洗脱感染细胞，将细胞悬液收集于离心管中，在4～8℃下以1800rpm离心5分钟，弃上清，加入含有稳定剂的疫苗液，混匀，收集，吸样做单瓶无菌检测，-80℃冻存；

(6)将单瓶无菌检测合格者，移入超声瓶中进行超声破碎，超声波频率30KHz，0.1～0.2秒/ml，以1000rpm离心10分钟，收集上清，即为病毒原液；

(7)将病毒原液合并、稀释成半成品，吸样进行无菌检测，并立即进行分装、冻干，即得到水痘减毒活疫苗。

2.如权利要求1所述的水痘减毒活疫苗，其特征在于：制备方法第(5)步中所加入的稳定剂配方如下：

序号  组分  重量份数1  NaCl  32  KCl  0.13  KH₂PO₄  0.24  Na₂HPO₄·12H₂O  3.35  蔗糖  506  谷氨酸钠  0.47  卡那霉素(100单位/ml)  0.18  红霉素(30单位/ml)  0.03

将以上各组分均溶于重量份数为1000的去离子水中，即得稳定剂。