[发明专利]生产抗癌药物TAT(m)-Survivin(T34A)的工程菌的发酵放大工艺无效
申请号: | 200710046421.8 | 申请日: | 2007-09-26 |
公开(公告)号: | CN101157949A | 公开(公告)日: | 2008-04-09 |
发明(设计)人: | 魏东芝;马兴元;张海毅;姚雪凌;王恒伟;李明华;郑文云;赵莉;刘清海 | 申请(专利权)人: | 华东理工大学 |
主分类号: | C12P21/02 | 分类号: | C12P21/02;C12R1/19 |
代理公司: | 上海智信专利代理有限公司 | 代理人: | 缪利明 |
地址: | 200237*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 生产 抗癌 药物 tat survivin t34a 工程 发酵 放大 工艺 | ||
1.一种生产抗癌药物TAT(m)-Survivin(T34A)的工程菌的发酵放大工艺,其特征在于,包括以下步骤:
A)将种子液接种于发酵液中发酵培养,培养温度为35-38℃,pH为6.5-7.5,通气量为2-5ml/min,生长期溶解氧浓度控制在5-80%;
B)当培养5-6h后,以恒pH方法加入葡萄糖溶液培养,待菌体浓度达到3-5g/L时开始诱导;
C)诱导时,首先加入无机氨盐,然后加入IPTG,同时补入葡萄糖,维持发酵罐中碳源浓度为0,溶解氧浓度控制在40-60%,培养4-5h,收集菌体。
2.如权利要求1所述的工艺,其特征在于,所述种子液按2-8%的接种量接种。
3.如权利要求1所述的工艺,其特征在于,步骤B中所述葡萄糖溶液浓度为200-500g/L。
4.如权利要求1所述的工艺,其特征在于,所述无机氨盐为硫酸铵。
5.如权利要求1所述的工艺,其特征在于,所述IPTG浓度为0.75mM。
6.如权利要求1所述的工艺,其特征在于,所述IPTG为间断性加入。
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