[发明专利]一种麻疹腮腺炎风疹联合减毒活疫苗的制备方法

说明书

技术领域

本发明属生物制品领域，具体涉及一种麻疹腮腺炎风疹联合减毒活疫苗的制备方法。

背景技术

1、疾病性质和流行情况

麻疹、流行性腮腺炎(简称腮腺炎)、风疹是由相应病毒引起的儿童最常见的急性呼吸道传染病。世界卫生组织(WHO)报道全球每年麻疹发病率3000^-4000万例，死亡70多万。我国卫生部2005年和2006年两年的全国疫情报告，麻疹发病人数22.27万例，腮腺炎发病56.25万例，风疹发病6.24万例。这三种疾病近几年发病率高，不断在全国局部地区暴发流行，风疹又可使孕妇早期感染而导致婴儿先天性畸型，即先天性风疹综合征(CRS)。可见这三种传染性疾病仍严重威胁着儿童的身心健康和我国优生优育基本国策。

为此，我国政府积极响应WHO的号召，承诺在2012年基本实现消除麻疹的目标，同时今年起将腮腺炎和风疹纳入国家新扩大免疫预防的15种疾病之内，财政将出资25亿用于采购针对包括麻疹、腮腺炎、风疹这15种疾病的疫苗和预防接种，而且明确优先使用联合疫苗。

2、疫苗开发和使用情况

国外于上世纪70年代开发成功麻疹-腮腺炎、麻疹-风疹和麻疹-腮腺炎-风疹联合减毒活疫苗(MMR)，以史克和默克两大公司为主的MMR于上世纪90年代中进入中国市场。

国内上海生物制品研究所于上世纪60年代初分离麻疹病毒，研究成功沪-191株麻疹减毒活疫苗。并于1993年对沪-191株毒种的纯化研究，建立了纯化毒种的三级种子库，进一步提高了麻疹疫苗的内在质量。目前已有近40年的生产历史，年产量可达6000万剂量，为全国之最，对预防和控制麻疹的发病和流行发挥了十分有效的作用。上海生物制品研究所于上世纪80年代初通过国际交往获得腮腺炎疫苗病毒，经研究建立S79腮腺炎减毒株，是国内第一个开发出细胞培养的腮腺炎减毒活疫苗。目前年产量可达1000万剂量，对控制腮腺炎的发病显示了十分有效的作用。上世纪90年代中由北京生物制品研究所开发成功BRD II株风疹减毒活疫苗。上海生物制品研究所通过与北京生物制品研究所技术交换，获得BRDII株风疹病毒，于1998年开发成功BRD II株风疹减毒活疫苗。目前年产量可达1000万剂量，对防止风疹流行和CRS发挥了显著的作用。与此同时，上海生物制品研究所响应WHO开发联合疫苗的倡导，于2000年开发成功麻疹腮腺炎联合减毒活疫苗，并被纳入《中国药典》三部(2005年版)药品标准。目前在上述的技术基础上，进一步开发麻疹腮腺炎风疹联合减毒活疫苗(MMR)，现已完成临床研究及通过国家药审中心的技术审评。

3、产品的水平和发展趋势

目前国内该产品的质量达到国际公认的WHO标准，生产工艺技术水平也基本相同。但我国主要生产单价疫苗，联合疫苗刚起步，远远不能满足社会需求。

发展趋势：WHO倡导的“全球儿童疫苗计划”，将开发联合疫苗作为其中的一项主要内容。联合疫苗的优越性在于：将多种单价疫苗的功能集于一个制品，发挥出一针防多病，减少针次，便于临床上推广使用，进一步提高计划免疫工作的效果，还可节约预防工作的间接成本。国内近几年才研究病毒类联合疫苗。

发明内容

本发明的目的是提供一种国产化、价格低、减少针次、一针防三病，用于儿童预防麻疹、腮腺炎和风疹的联合减毒活疫苗的制备方法。

本发明所述的一种麻疹腮腺炎风疹联合减毒活疫苗的制备方法，具体通过以下步骤得以实现：1、用10日龄的无特定病原体(SPF)鸡胚制成原代鸡胚细胞，采用10L瓶旋转培养成单层细胞，分别接种沪-191株麻疹病毒和S79株腮腺炎病毒，经培养收集麻疹病毒液和腮腺炎病毒液，再经外源因子等检定合格，通过澄清过滤合并成两种单价病毒原液；2、用MRC-5株人二倍体细胞培养BRD II株风疹病毒，收获病毒液，经外源因子等检定合格，通过澄清过滤合并成单价病毒原液；3、将合格的麻疹、腮腺炎和风疹单价病毒原液按一定比例配制，加入冻干保护剂制成半成品，最后分装冻干制成最终成品。

在上述麻疹腮腺炎风疹联合减毒活疫苗的制备方法中，麻疹、腮腺炎和风疹单价病毒原液配制比例优选为麻疹:腮腺炎:风疹＝1:20:1，冻干保护剂优选5％蔗糖、1％明胶、1％谷氨酸钠、0.5％尿素、0.5％人白蛋白。

通过本发明制备的麻疹腮腺炎风疹联合减毒活疫苗，其产品的质量达到三种单价疫苗的国家标准，并且主要质量指标均达到WHO对麻疹、腮腺炎和风疹联合疫苗的质量标准。