[发明专利]可溶性转化生长因子-β受体基因在治疗皮肤瘢痕中的应用无效
申请号: | 200710046674.5 | 申请日: | 2007-09-29 |
公开(公告)号: | CN101249267A | 公开(公告)日: | 2008-08-27 |
发明(设计)人: | 刘伟;高振;武晓莉 | 申请(专利权)人: | 上海交通大学医学院附属第九人民医院 |
主分类号: | A61K48/00 | 分类号: | A61K48/00;A61P17/02 |
代理公司: | 上海泰能知识产权代理事务所 | 代理人: | 黄志达;谢文凯 |
地址: | 200011上*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 可溶性 转化 生长因子 受体 基因 治疗 皮肤 瘢痕 中的 应用 | ||
1.可溶性转化生长因子-β受体基因应用于皮肤瘢痕的治疗。
2.根据权利要求1所述的可溶性转化生长因子-β受体基因应用于皮肤瘢痕的治疗,其特征在于:该基因是可溶性转化生长因子-β受体II型和III型受体基因。
3.根据权利要求1所述的可溶性转化生长因子-β受体基因应用于皮肤瘢痕的治疗,其特征在于:所述的可溶性转化生长因子-β受体基因的制备方法是(1)提取人皮肤成纤维细胞的RNA,进行RT-PCR反应,克隆hsTβRII和hsTβRIII基因序列;(2)将hsTβRII和hsTβRIII基因序列构建入质粒载体pVAX1,形成重组表达质粒pVAX1/hsTβRII和pVAX1/hsTβRIII;(3)将重组质粒转染COS-7细胞,检测目的基因的转录、表达以及目的蛋白的功能;(4)将pVAX1/hsTβRII和pVAX1/hsTβRIII混合后注射于局部皮肤,用电穿孔的方法转染后作线性切口,观察切口部位基因表达和瘢痕的形成状况。
4.根据权利要求3所述的可溶性转化生长因子-β受体基因应用于皮肤瘢痕的治疗,其特征在于: 所述的RT-PCR反应中,hsTβRII基因的上游引物序列为5′-GCTGGGGGCTCGGTCTATGA-3′,下游引物序列为5′-ACTAGTCAGGATTGCTGGTGTTATA-3′;hsTβRIII基因的上游引物序列为5′-CCAAGCTTGCTAAAGTGACTGGACGAGACG-3′,下游引物序列为5′-GCGAATTCTCAGTCCAGACCATGGAAAATTGG-3′。hsTβRII基因的PCR反应条件为95℃ 3min变性,95℃1min、62℃45s、72℃45s为一个循环,共27个循环,72℃延伸5min;hsTβRIII反应条件为95℃3min变性,95℃1min、66℃1min、72℃3min为一个循环,共27个循环,72℃延伸5min。
5.根据权利要求3所述的可溶性转化生长因子-β受体基因应用于皮肤瘢痕的治疗,其特征在于:所述的pVAX1/hsTβRII和pVAX1/hsTβRIII混合是等摩尔混合。
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