[发明专利]一种海南斑等蝎抗菌肽及制备方法和应用

说明书

技术领域

本发明属于生物技术领域，本发明涉及一种海南斑等蝎毒抗菌肽，还涉及该抗菌肽基因的制备方法，同时还涉及该基因的用途，高活性抗菌肽的分子设计和抗菌功能鉴定。具体地说，本发明涉及一种海南斑等蝎抗菌肽基因的分离鉴定；涉及一种蝎抗菌肽的抗菌谱鉴定：采用化学合成手段生产的海南斑等蝎毒抗菌肽对革兰氏阳性菌具有广谱抗性，而革兰氏阴性菌无作用；涉及蝎抗菌肽对临床分离的耐药溶血性葡萄球菌有效；还涉及一种蝎抗菌肽的高活性分子设计和抗菌功能鉴定：分子设计的蝎抗菌肽不但提高了对革兰氏阳性菌的抑菌效果，而且对革兰氏阴性菌也有了抗性，具有潜在抗菌药物开发的价值。

背景技术

抗生素耐药性问题已成为全球关注的焦点。中国是世界上滥用抗生素较为严重的国家，耐药菌引起的医院感染人数，已占到住院感染患者总人数的百分之三十左右。耐药菌另一个危害是可以在不同地区、国家之间的人群之间传播。肺炎链球菌是引起细菌性肺炎的常见病源菌，近年来肺炎链球菌对抗生素耐药性呈上升趋势，并已出现多重耐药菌株，是临床感染控制中棘手的难题。

大量研究表明，在感染病菌或可能导致病菌感染(注射细菌或真菌，体壁损伤等)的情况下，昆虫能快速合成大量抗菌肽，迅速杀灭已侵入的病菌，并阻止病菌的继续侵染。到目前为止，在昆虫中已发现了大量的抗细菌肽，抗真菌肽，以及既抗真菌又抗细菌的抗菌肽。这些抗菌肽不仅对细菌、真菌有广谱抗菌能力，对病毒、原虫及癌细胞也有作用。此外，还有作用机制独特，对高等动物正常细胞无害等特点，在面临抗药性和筛选新的抗生素极端困难的情况下，昆虫抗菌肽可能成为抗生素的新来源。

蝎子是我国的一种传统名贵中药，2000多年前就记载了蝎子的药用史。明朝《本草纲目》更详细记载蝎主治“诸风瘾疹、中风、半身不遂、口眼歪斜、语涩、手足抽挚，小儿惊痫风搐”等多种疾病，具有抗肿瘤，杀虫，抑菌和抗菌功效，其作用主要来源于蝎尾毒腺分泌的毒液。毒液的主要成分是一类由10-100个氨基酸组成的具有多种生物活性的小分子多肽，它们可以选择性、特异性的与细胞膜上的膜蛋白相互作用，从而改变细胞对离子的通透能力，调节细胞体积、pH、膜电位、兴奋性等多种细胞代谢过程和细胞分泌、激素作用和信号转导等多种生理过程。据估计，约有100000种不同生物活性肽存在于各种蝎毒腺中。因此，蝎毒素具有重要的理论研究意义和应用开发价值。