[发明专利]一种骨肽注射液制备方法

说明书

技术领域：

本发明属于医药技术领域。

背景技术：

骨肽注射液是新鲜或冷冻的猪或胎牛的四肢骨经提取制成的无菌水溶液。其主要成份为有机钙、磷、无机钙、无机盐、微量无素、氨基酸等。本工艺过程尚无公开报道，简便、实用、稳定，适合于大工业生产。

发明内容：

本发明的过程是：

a、提取、去脂：取健康新鲜猪或胎牛四肢骨，洗净、打碎、称重，加水，热压，用纱布过滤，骨渣再加水，同上法操作。过滤，合并两次滤液，立即置于夹层锅中通冷却水，冷至室温，放置于冷库中，待冷却至0--5℃转入冷室中静置，撇去上层脂肪，加温使冻状物融成液体，浓缩，得浓缩液。

b、水解：将浓缩液用盐酸调pH3左右，按1-3％加入胃蛋白酶，水解2-4小时。

c、酸沉、碱沉：将上述液体于pH加热至100℃，持续30分钟，冷却，吸上清，再用NaOH调pH至8.5左右，加热至100℃，持续30分钟，冷却，吸上清。

d、过滤及超滤：将上述清液过滤至清，再过一万分子量超滤柱三次，即得骨肽溶液。

e、制剂：将骨肽原液按质量标准方法测定多肽含量，加水调至每毫升大于5mg，调pH至5.5-7.5，除菌、过滤、灌封、灭菌即得。

本发明优点：

1、整个工艺过程中无任何防腐剂，从而使制剂更安全。

2、最大程度保留了骨胶原蛋白成份，有利于骨的营养和有效成份的提供。

3、除去了大分子物质，使整体制剂成分分子量均小于1万，保证了制剂不过敏。

4、整个工艺简单，易行，稳定可靠，尤其适用于工业化生产。

本发明的详细工艺过程：

1、提取、去脂、浓缩：取健康新鲜猪四肢骨，洗净，打碎称重。每75kg原料加水75kg，于1.2kg/cm²热压2小时，用双层纱布过滤，骨渣再加水75kg，同上操作热压1小时，过滤，合并两次滤液。于夹层锅内冷却至室温，放置于-20至-30℃冷库中，待冷却至0-5℃转入冷室中静置12-24小时，撇去上层脂肪，加温使冻状物融成液体。

2、水解：将上述提取物调pH3左右，按1-3％加入胃蛋白酶，水解4小时。

3、酸沉：将上述液于100℃加热30分钟，继续酸水解，冷却吸出上清。

4、碱沉：上述上清调pH8.5左右，加热至沸腾，持续30分钟，继续碱水解冷却，吸上清。

5、超滤：上述上清液调pH至7.4，过滤至清，过一万分子量超滤三次，即得骨肽原液，得原液180000毫升。

6、制剂：将骨肽原液按双缩脲法测定多肽含量，加水调至5.0-6.0mg/ml，PH5.5-7.5，除菌过滤，灌封，105℃灭菌40分钟即得。

实验：

1、收率实验：

精密量取本品2ml，置试管中，精密加入双缩脲试液(取硫酸铜1.50g和洒石酸钾钠5.0g，加水500ml使溶解，边搅边加入10％氢氧化钠溶液300ml，用水稀释至1000ml，混匀)4ml，混匀，室温放置30分钟，照分光光度法，在540nm的波长处测定吸收度，另精密称取酪蛋白对照品适量，加0.05mol/L氢氧化钠试液制成每1ml中约含7mg的溶液，精密量取2ml，自置试管中……起，同法操作，测定吸收度，计算。

实验结果如下：

2、过敏实验，热源实验，异常毒性，按质量标准WS1-XG-035---2000检验均符合规定。

3、其它各项指标均符合注射剂通则及WS1-XG-035---2000骨肽注射液质量标准。