[发明专利]香雪兰体外简化培养的方法

说明书

技术领域

本发明属花卉栽培繁殖方法特别涉及香雪兰组织培养简化的方法。

背景技术：

植物组织培养既植物无菌培养技术，是根据植物细胞具有全能性的理论利用植物体离体的器官、组织、细胞作为外植体，在无菌和适宜的人工培养基及光照和温度条件下，能诱导出愈伤组织、不定芽、不定根，最后形成完整的植株。组织培养是在无性繁殖、花卉育种、植株脱病毒和种质保存等方面广泛采用的一种技术。植物组织培养技术发明以来已经取得了很大的进展，自上世纪60年代法国的Morel用茎尖培养的方法大量繁殖兰花获得成功以后，植物组织培养已经从实验室研究阶段一跃而成为一种大规模成批量的工厂化生产方法。无性繁殖系快速繁殖的生产、试管品种的商品化，是目前植物组织和细胞培养技术在应用上的主流之一。而组织培养产业化的关键是培养成本的降低。近20年，人们在组织培养的成本和经济效益方面做了许多研究，并取得了一定的成果。

香雪兰(Freesia)又名小苍兰，鸢尾科香雪兰属多年生球根草本花卉植物，原产于非洲南部好望角，现世界各地都有种植，是世界十大名贵切花之一。香雪兰由于其花期较早，花色艳丽，花宜宜人，插花期长而越来越受到世人的喜爱，其需求量也逐年上升。种子繁殖和种球繁殖是香雪兰的传统繁殖方式：种子繁殖所需要的周期时间长；种球繁殖繁殖率低且存在退化现象，这两种方法都不适合香雪兰的大量生产。长期以来，世界各地不断尝试各种手段进行香雪兰的快速繁殖，以满足人们日益增长的市场需求，而在短时间内培养出大量优质香雪兰的唯一途径就是组织培养。王丽发明的香雪兰的快速繁殖技术(专利号：ZL：031270573)在一定程度上解决了香雪兰常规繁殖存在的问题，达到了在短时间内大量繁殖优质香雪兰种球的要求。利用组织培养方法培育香雪兰具有不受季节、环境限制和繁殖系数高、繁殖速度快等优点，因此更符合工厂化规模化生产的需求。然而，香雪兰的快速繁殖目前还是停留在实验室研究阶段，没有真正用于商业化生产。如何降低香雪兰的生产成本，是香雪兰体外快速繁殖产业化的关键。本发明即通过实现香雪兰体外简化培养的方法，从而达到低成本快速繁殖的目的，为香雪兰组培产业化创造了条件。

发明内容

本发明目的是在香雪兰组织培养技术的基础上，提供一种香雪兰体外简化培养的方法，促进香雪兰产业化。

香雪兰体外简化培养的方法具体内容：

本发明使用的外植体为未成熟的香雪兰(常规栽培种)幼花序，丛生芽诱导时所使用的基本培养基为：N₆+1～2mg/L 2，4-二氯苯氧乙酸(2，4-D)+2～4mg/L 6-苄基氨基嘌呤(6-BA)，生根时所用的基本培养基为1/2MS+0.1～1mg/L萘乙酸(NAA)，诱导成球时1/2MS培养基(含0.2％的活性炭)作为基本培养基[来源：香雪兰的快速繁殖技术(专利号：ZL：031270573)]。在此基础上主要从培养基的简化，培养条件的简化，培养容器简化三个方面对香雪兰的组织培养技术进行研究，降低生产成本，促进香雪兰工厂化生产和大面积推广。

1.培养基方面的简化

琼脂、分析蔗糖、蒸馏水是培养基中价格较高的成分，约占培养基成本的95％。如在琼脂、分析蔗糖、蒸馏水三者上加以简化，则培养基的成本就能显著降低。

香雪兰体外简化培养中我们采用的是简化的培养基：以价格低廉的自来水和食用白糖替代传统培养基中价格较高的蒸馏水和分析蔗糖(蒸馏水的价格是自来水的100倍，分析纯蔗糖的价格是普通白糖的5倍)，同时降低了琼脂的浓度。与正常的培养基相比，本发明所使用的简化培养基可以使生产成本减低60％以上。

2.培养容器的简化

香雪兰组织培养不宜选用普通的三角瓶。与一些组织培养材料不同，香雪兰的丛生芽经过3-4个月的培养后有的可以长到8-9厘米高，接种在容积小的三角瓶不利于丛生芽的生长，如用容积较大的三角瓶，其价格比较昂贵。为了降低培养成本，在单位面积里得到更多的组培苗，我们选用可以反复利用的透广度好的ZP300带盖广口瓶(购于上海稼丰园艺用品有限公司)。ZP300带盖广口瓶一方面比大容积的三角瓶便宜，另一方面省去了常规组织培养时用棉塞封口的麻烦，操作起来比三角瓶方便，在一定程度上节省了劳动时间，减低了劳动成本。

3.培养条件的简化

香雪兰组织培养时要求温度在24-27℃，光照为10-12小时/天，实验室研究阶段是通过植物光照培养箱来调控这些因素的。在本发明中采用培养室培养：节能白炽灯作为光源，并通过人工调控光周期以达到降低成本的目的。