[发明专利]以萤火虫荧光素酶为报告基因的BIV感染性指示细胞系有效

专利信息
申请号: 200710057671.1 申请日: 2007-06-19
公开(公告)号: CN101100674A 公开(公告)日: 2008-01-09
发明(设计)人: 乔文涛;姚雪;陈启民;耿运琪 申请(专利权)人: 南开大学
主分类号: C12N15/65 分类号: C12N15/65;C12N15/53;C12N5/10
代理公司: 天津佳盟知识产权代理有限公司 代理人: 侯力
地址: 300071*** 国省代码: 天津;12
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摘要:
搜索关键词: 萤火虫 荧光 报告 基因 biv 感染性 指示 细胞系
【权利要求书】:

1、一个用于构建指示细胞系的可以应答牛免疫缺陷病毒感染的指示质粒,具有序列表所示核苷酸序列;即将萤火虫荧光素酶(firefly luciferase)的基因插入到一种特异应答牛免疫缺陷病毒反式激活因子的应答元件下游,质粒含有G418抗性基因。

2、根据权利要求1所述的指示质粒,其特征是所述的特异应答牛免疫缺陷病毒反式激活因子的应答元件是BIV LTR全长序列。

3、一株由权利要求1所述指示质粒构建的指示牛免疫缺陷病毒感染的细胞系,其保藏号为CGMCC No.2049。

4、根据权利要求3所述的指示牛免疫缺陷病毒感染的细胞系,其特征是该细胞系的构建过程如下:将权利要求1中牛免疫缺陷病毒感染的指示质粒转染BHK-21细胞,加入G418进行筛选稳定表达的细胞系,初筛三周后,将抗性细胞进行单克隆化;通过转染BIV反式激活因子48小时后检测萤火虫荧光素酶的活性来分别鉴定每个单克隆特异响应BIV反式激活因子的能力,最终挑选经过BIV病毒攻击后萤火虫荧光素酶的活性明显增高的阳性克隆即为BIV的指示细胞系。

5、一种权利要求3所述的指示牛免疫缺陷病毒感染的细胞系的应用,其特征是利用该细胞系实现定量指示BIV感染性及响应BIV反式激活因子的激活。

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