[发明专利]一株α-淀粉酶抑制剂生产菌及α-淀粉酶抑制剂的制备方法与应用有效
申请号: | 200710058410.1 | 申请日: | 2007-07-27 |
公开(公告)号: | CN101139569A | 公开(公告)日: | 2008-03-12 |
发明(设计)人: | 白钢;耿鹏;张蕾;高智慧;张奇 | 申请(专利权)人: | 南开大学 |
主分类号: | C12N1/21 | 分类号: | C12N1/21;C12N15/31;C07K4/04;C07K1/34;C07K1/22;A61K38/16;A61P3/10;A61P3/04;A23L1/305 |
代理公司: | 天津佳盟知识产权代理有限公司 | 代理人: | 侯力 |
地址: | 300071*** | 国省代码: | 天津;12 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 淀粉酶 抑制剂 生产 制备 方法 应用 | ||
1.一株新的α-淀粉酶抑制剂生产菌株,即天蓝黄链霉菌南开变种ZG0656(Streptomycescoelicoflavus var.nankaiensis ZG0656),保藏于“中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心”,其保藏号为CGMCC No.2097。
2.根据权利要求1所述的生产菌株,其特征为16S rDNA序列为序列表所列的天蓝黄链霉菌16S rDNA序列。
3.一种用权利要求1所述的生产菌株制备α-淀粉酶抑制剂的方法,其特征是该方法包括:
第一、发酵:常规法,培养权利要求1所述的能产生α-淀粉酶抑制剂的生产菌株,使其发酵液中积累一定量的α-淀粉酶抑制剂;
第二、一级膜分离:采用截留分子量为10000~150000的膜系统,直接用一级膜分离系统,去除菌丝体,培养基中的可溶性蛋白和大分子,以及部分色素,得到澄清滤液;
第三、二级膜分离:通过一级膜分离系统得到的澄清滤液,再通过二级膜分离,采用截留分子量为5~500的膜系统,进一步浓缩,并脱盐脱色,除去部分单糖,大量无机盐等小分子杂质,得到澄清浓缩液;浓缩液电导值应为2000us/cm以下;
第四、树脂吸附与洗脱:通过二级膜分离系统得到的澄清浓缩液,以树脂吸附α-淀粉酶抑制剂,并进行洗脱;
第五、浓缩与干燥:从树脂洗脱的α-淀粉酶抑制剂溶液,用纳滤膜浓缩,经减压干燥处理后得到α-淀粉酶抑制剂混合物精制品。
4.根据权利要求3所述的方法,其特征是:一级膜分离系统采用截留分子量为10000~50000的各种超滤膜系统;二级膜分离系统采用截留分子量为150~300的各种超滤膜系统,浓缩液电导值在1000us/cm以下。
5.根据权利要求3所述的方法,其特征是:吸附树脂为大孔吸附树脂、或阳离子交换吸附树脂、或二者的组合。
6.根据权利要求5所述的方法,其特征是:吸附树脂优选大孔吸附树脂和阳离子交换吸附树脂二者的组合。
7.根据权利要求5所述的方法,其特征是:大孔吸附树脂选择各类吸附非极性物质的系列树脂,洗脱时采用体积分数为20~90%的乙醇或丙酮水溶液;
阳离子交换吸附树脂选择各类强酸性阳离子交换吸附树脂,洗脱时采用0.5~2.5M的氨水溶液。
8.根据权利要求7所述的方法,其特征是:大孔吸附树脂优选X-5型或HP-20型大孔吸附树脂;洗脱时优选采用体积分数为40~50%的乙醇水溶液;
阳离子交换吸附树脂优选是001×7型或001×4型强酸性阳离子交换吸附树脂,洗脱时优选采用1M的氨水溶液。
9.根据权利要求3所述的方法,其特征是:第五步浓缩α-淀粉酶抑制剂溶液用的纳滤膜是截留分子量为5~500的膜系统。
10.一种权利要求3所述方法制备的α-淀粉酶抑制剂的应用,其特征是:该α-淀粉酶抑制剂用于制备治疗糖尿病、肥胖症的药物或功能性食品。
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