[发明专利]原花青素B2的提取方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种原花青素B2的提取方法。

背景技术

原花青素(proanthocyanidins或procyanidins，简称PC)是植物界中广泛存在的一大类多酚化合物的总称。起初统称为缩合鞣质或黄烷醇类。随着分离鉴定技术的不断发展以及对此类物质研究的不断深入，现已成为独立的一大类物质，统称之为原花青素。原花青素是由多羟基黄烷-3-醇单元构成的低聚体和多聚体，由不同数量的儿茶素或表儿茶素结合而成^[1]。原花青素具有抗氧化、保护心血管、抗肿瘤、抗糖尿病、抗衰老、抗辐射、减肥美容等多种保健功效^[2-3]。原花青素B2是原花青素中主要的活性成分，是由两个表儿茶素结构以4-8位连接而成。目前市场上销售的含有原花青素的植物提取物中原花青素B2的含量较低为1-15％。本发明将提供一种制备高含量原花青素B2的方法。

参考文献：

[1]Fuleki T，Ricardo da silva J M.Catech in and procyanidin composition of seeds from grape cultivate grownin ontario[J].J Ag ric Food Chem，1997，45：1156-1160.

[2]Chang H.Research Progress in Pharmacological activity of Oligomeric Proanthocyanidins in Grape SeedsExtracts[J].Foreign Medical Sciences(Section of Hygiene)(国外医学卫生学分册)，2005，32：72-76.

[3]Zhang B R，Lao Y X，Su W W.Research and Development Status Quo of Oligomeric Proanthocyanidins[J].Jorunal of Chinese Medicinal Materials(中药材)，2003，26：905-908.

发明内容

本发明的目的是提供一种原花青素B2的提取方法。

本发明的技术方案概述如下：

一种原花青素B2的提取方法，包括如下步骤：

(1)以松科松属植物的根、树皮、叶；或蔷薇科植物的根、茎、叶、果实、种子；或葡萄科葡萄属植物的根、茎、果实、种子；或豆科植物的茎或种皮为原料；向所述原料中加入4-10重量倍的水或4-10重量倍的体积百分比浓度为10％～95％的乙醇水溶液或4-10重量倍的10％～95％的甲醇水溶液，常压，70-95℃浸提取1～5小时，过滤，提取次数为1～5次，提取液合并静置至温度低于50度，弃沉淀，得上清液，在温度≤60℃，真空度为0.06～0.08MPa减压浓缩至糖度2-40，得到提取物；

(2)将所述提取物以重量比为1∶1～10的比例分散至水中，经大孔树脂吸附，用水及体积百分比浓度为10％～95％的乙醇水溶液或水及体积百分比浓度为10％～95％的甲醇水溶液梯度洗脱，通过薄层层析方法并结合分析型HPLC检测，收集富含原花青素B2的组分，将洗脱液在温度≤60℃，真空度为0.06～0.08MPa减压浓缩，得糖度为10～40的浓缩物；

(3)将步骤(2)的产物进行聚酰胺树脂分离，用水及体积百分比浓度为20-95％的乙醇水溶液或水及体积百分比浓度为20-95％的甲醇水溶液梯度洗脱，通过薄层层析方法并结合分析型HPLC检测，收集富含原花青素B2的组分，将洗脱液在温度≤60℃，真空度为0.06～0.08MPa减压浓缩，得糖度为10-20的原花青素B2。

所述步骤还可以包括：(4)将所述步骤(3)制备的原花青素B2进行ODS中低压柱层析，用水及体积百分比为10％-50％的甲醇水溶液梯度洗脱，通过薄层层析方法并结合分析型HPLC检测，以原花青素B2纯品作为对照品，收集富含原花青素B2的组分，并将其在温度≤60℃，真空度为0.06～0.08MPa减压浓缩，得糖度为10-20的原花青素B2。