[发明专利]2型糖尿病大鼠模型的制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种动物模型的制备方法，具体涉及一种2型糖尿病大鼠模型的制备方法。本发明制备的2型糖尿病大鼠模型可以用于分析2型糖尿病病理及进行2型糖尿病药物的筛选。

背景技术

糖尿病是一种古老而年轻的疾病，早在公元前，我国的《黄帝内经》就对其病因病症及治疗原则做了详细的论述。随着社会的发展、物质的丰富，绝大多数人的能量摄入由长期的相对不足，在短期内快速转变为相对过剩，而人类在长期能量供应不足的繁衍过程中所形成的以节约能量为主要使命的节约基因(thrify genotype)却难于在短期内发生变化，仍然起着固有的作用，致使糖尿病的发病率直线上升，向当今年医学提出了严峻的挑战。

糖尿病与心血管疾病的流行趋势相当，是现代疾病中的第二杀手，在各种疾病的死亡率中仅次于癌症。据国际糖尿病联盟(IDF)统计，目前全世界有患糖尿病危险的人超过3亿，到2025年，糖尿病患病人数将从现在的1.94亿升至3.33亿，发展中国家的糖尿病人数将超过世界总糖尿病人数的75％。

现在，2型糖尿病(T2DM)已经占到糖尿病患者的90％以上。T2DM患者体内产生胰岛素的能力并非完全丧失，有的患者体内胰岛素甚至产生过多，但胰岛素的作用效果却大打折扣，因此患者体内的胰岛素是一种相对缺乏。T2DM的病理特征包括外周组织胰岛素抵抗以及胰腺p细胞分泌胰岛素的损伤，其表型包括高空腹血糖、高胰岛素血症、糖耐量低减、肝糖原合成不足及糖异生途径异常活跃等。一般认为，T2DM的发病除了遗传因素外，也与环境因素的诱导密切相关。

但是，目前对于T2DM的机理还有很多不明之处，有待进一步研究。而适当的T2DM动物模型则是用于分析T2DM病理及进行胰岛素抗性研究，并进行T2DM药物筛选和鉴定治疗药物体内功效的临床前必需工具。

以往多是通过手术和化学办法减少动物胰岛β细胞分泌胰岛素来建立糖尿病动物模型，特点是胰岛素分泌缺乏所致的高血糖和“三多一少症”(多饮、多食、多尿、消瘦)，此类方式造成的高血糖动物更倾向于1型糖尿病(IDDM)模型，而与T2DM的病理特征和临床特点相差甚远。

现有的2型糖尿病动物模型多为遗传性自发性动物模型，发病率偏低，不能很好地模拟人体2型糖尿病的发病过程。

目前制备T2DM大鼠模型的方法主要有3种：

1.应用小剂量(25mg/kg)链脲佐菌素(STZ)和高热量饲料给予成年大鼠的造模方法；

2.中剂量STZ(30mg/kg)连续注射加高热量饲料给予成年大鼠的造模方法；

3.给予出生后2天的新生雄鼠腹腔注射大剂量STZ(90mg/kg)的造模方法。

但上述方法的造模时间普遍相对较长，而且一些方法制备的T2DM大鼠模型空腹血糖低，达不到临床诊断糖尿病的标准。

发明内容

本发明的目的是提供一种2型糖尿病大鼠模型的制备方法，该方法制备的大鼠模型具有高空腹血糖、高胰岛素血症、糖耐量低减、胰岛素抵抗等2型糖尿病的典型症状，是较为理想的T2DM大鼠模型。

本发明的2型糖尿病大鼠模型的制备方法是先用链脲佐菌素造成新生鼠胰岛β细胞对糖反应性下降，对断乳大鼠再次小剂量注射链脲佐菌素，造成胰岛轻度损伤，同时给予高糖高脂饮食诱导，使产生胰岛素抵抗，得到2型糖尿病大鼠模型。

本发明的2型糖尿病大鼠模型的具体制备方法包括以下步骤：

1.按照90mg/kg体重剂量向2d龄大鼠腹腔注射200mg/mL链脲佐菌素(STZ)溶液，哺乳喂养至断乳；

2.按照25mg/kg体重剂量向断乳大鼠腹腔注射5mg/mL链脲佐菌素溶液；

3.给予高糖高脂饮食饲养，4～8周得到T2DM大鼠模型。

本发明的2型糖尿病大鼠模型制备方法中，高糖高脂饮食饲料是由基础鼠饲料加蔗糖、猪油和蛋黄组成的，其重量百分比例为猪油18％，蔗糖20％，蛋黄3％，基础鼠饲料59％。制成的高糖高脂饮食饲料总热量21.37kJ/g，蛋白质含量15％，碳水化合物含量51％，脂肪含量25％。

其中，基础鼠饲料是由20％小麦粉、41％玉米粉、15％麸皮、20％豆粉、2％骨粉和2％鱼粉配制而成的，总热量为13.85kJ/g，蛋白质含量23％，碳水化合物含量50％，脂肪含量5％。