[发明专利]一种鹿茸细胞培养方法有效
申请号: | 200710064481.2 | 申请日: | 2007-03-16 |
公开(公告)号: | CN101265463A | 公开(公告)日: | 2008-09-17 |
发明(设计)人: | 郑海发;申大为;高伟 | 申请(专利权)人: | 郑海发;高伟 |
主分类号: | C12N5/06 | 分类号: | C12N5/06 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 100071北京市北*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 鹿茸 细胞培养 方法 | ||
1. 一种鹿茸细胞培养方法,优选为梅花鹿。其特征为采用鹿茸细胞进行悬浮培养以获取更多的鹿茸细胞。
2. 根据权利要求1所述的鹿茸细胞,其特征在于来源于梅花鹿以及马鹿的二杠茸。
3. 根据权利要求1所述的鹿茸细胞是以无菌手术机械法切割鹿茸组织,使其成为细小组织块,置入生长液在培养箱培养,收集足够的单层细胞,再以搅动式培养瓶培养。搅拌速度每3~5天传代一次,连续传代20~40次所得。
4. 按权利要求1所述的悬浮培养是调节鹿茸细胞生长液中气体、pH、温度等适宜条件,待生长达到最佳数量时多次灌注液体和分批收获。
5. 按权利要求1所述的悬浮培养鹿茸细胞培养基配方MEM(JORLIK改良MEM)基础液,补充1.5g/L葡萄糖,0.01mmol/L非必须氨基酸,5~10%小牛血清。
6. 按权利要求1所述的鹿茸细胞纯化将所获细胞悬液称量(称重)1000rpm离心5-10分钟,倾上清,加PBS洗后离心称重,分装冻存于-40℃。
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