[发明专利]武夷菌素高产菌株F64及发酵方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种微生物新菌株，具体地说是一种不吸水链霉菌武夷变种的高产菌株(Streptomyces anhygroscopicus var.wuyiensis)F64，本发明还涉及利用该菌株发酵生产生物农药-武夷菌素的方法。

背景技术

生物农药是21世纪农药产业发展的新方向，其中抗生素类杀菌剂是生物农药产业化发展最快的产品之一。武夷菌素是中国农业科学院研制的具有防病增产效果的生物农药产品，其来源于不吸水链霉菌武夷变种(Streptomyces anhygroscopicus var.wuyiensis)产生的一种抗生素(微生物学报，24：401-402，1984)，主要用于防治农作物真菌病害，具有高效、广谱、低毒、环境安全的特点，因此，在生态农业和绿色食品生产中具有广阔的应用前景。武夷菌素的生产是利用培养武夷菌素产生菌，通过生物深层发酵产生的微生物的次生代谢产物。工厂化发酵生产过程中所使用产生菌产素能力的高低以及培养基配方的优劣是决定抗生素生产成本、防效的关键因素。因此，通过遗传育种技术选育高产生产菌株、优化发酵培养基的营养成分以及营养成分的配比，对于降低武夷菌素的生产成本、能耗，提高防治农作物病害的效果，加快我国自主研发的农用抗生素产业化发展具有重要意义。

目前，武夷菌素产品的生产方法为二级生物发酵，生产上使用的产生菌生物效价约为2500-3000ug/ml，发酵培养时间为120小时。近几年，随着生产菌株传代增加，菌株退化严重，目前效价只有1800-2000ug/ml，培养时间也明显增加，同时，由于用原来的培养基配方生产武夷菌素发酵液中含糖过多，后处理的成本增加。耗能、费时。过高生产成本的严重影响武夷菌素的产业化生产。

研究武夷菌素杀菌剂的高产、高效的生产方法，对于提高我国的农用抗生素自行开发、创制的能力和水平，提高具有自主知识产权的新微生物农药产业化程度，不仅直接为农业生产提供新生物农药品种，而且为开发微生物农药产品提供基础。

发明内容

本发明的第一个目的是提供一种生产生物农药-武夷菌素的高产菌株(Streptomyces anhygroscopicus var.wuyiensis)F64。该菌株已于2007年3月12日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号为CGMCC No.1967。

本发明的另一个目的在于提供利用该菌株生产武夷菌素的发酵培养发法。

本发明以不吸水链霉菌武夷变种(Streptomyces ahygroscopicus var.wuyiensis)BO-10(韦日清等，微生物学报24：401-402，1984)为出发菌株，通过物理、化学和高能离子注入的诱变技术改进武夷菌素生产菌株，通过室内生物测定的方法筛选该菌种的高产突变菌株并确定菌株产素的稳定性，得到不吸水链霉菌武夷变种的高产菌株F64(Streptomyces anhygroscopicus var.wuyiensis F64)(保藏号为CGMCC1967)。该菌株在合成培养基上孢子丝呈十分紧密的长螺旋形，一般为5-12圈，孢子为椭圆或卵圆形，大小均匀，表面带细刺。在深层发酵条件下，菌丝生长呈网状；在高氏合成一号琼脂、察氏琼脂等培养基上培养，气生菌丝由灰白变为象灰、褐色；基内菌丝体为淡黄、麦秸黄或浅黄，并由淡黄、微黄色的可溶性色素产生。生理特性：水解淀粉，液化明胶块，纤维素上不生长，不产生硫化氢；利用D-木糖、D-葡萄糖、鼠李糖、棉子糖、甘露糖等，不利用L-阿拉伯糖。功能特性：对革兰氏阳性、阴性细菌，酵母菌及真菌有抑制作用，如枯草杆菌(Escherichia coli)，稻瘟病菌(Piricularia oryzae)，棉花枯萎病菌(Verticillium dahliae)等病原真菌。