[发明专利]一种热启动耐高温DNA聚合酶及其制备方法有效
| 申请号： | 200710065121.4 | 申请日： | 2007-04-04 |
| 公开（公告）号： | CN101050453A | 公开（公告）日： | 2007-10-10 |
| 发明（设计）人： | 郑卫国;熊勇华;陈光辉;涂祖新 | 申请（专利权）人： | 无锡中德美联生物技术有限公司 |
| 主分类号： | C12N9/00 | 分类号： | C12N9/00;C12N15/52 |
| 代理公司： | 北京三高永信知识产权代理有限责任公司 | 代理人： | 何文彬 |
| 地址： | 214174江苏*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 启动 耐高温 dna 聚合 及其 制备 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种热启动耐高温DNA聚合酶，其分子结构如下述通式(I)：
其中R1代表氢；R2代表氢、羟基或羰基；R3代表氢、甲基或丙烯酸基。
2.制备权利要求1所述的热启动耐高温DNA聚合酶的方法，该方法包括以下步骤：
A：将通式为(II)的化学修饰物溶解于无水乙醇、二甲基亚砜、无水四氢呋喃或甲酰胺至溶液终浓度为0.1-1.05mol/L，
其中，R代表琥珀酸基、五氟取代的苯酚或对硝基苯酚；R1代表氢；R2代表氢、羟基或羰基；R3代表氢、甲基或丙烯酸基；将以上化学修饰物溶液按摩尔比2-89.4∶1加入pH为8.0-8.5的耐高温DNA聚合酶溶液中，4-37℃反应2-14小时；
B、将反应产物采用透析、过柱或超滤方法纯化，即得到热启动耐高温DNA聚合酶。
3.如权利要求2所述的制备热启动耐高温DNA聚合酶的方法，其特征在于：化学修饰物溶液按摩尔比为10-30∶1加入pH为8.0-8.5的耐高温DNA聚合酶溶液中，4-10℃反应6-14小时。
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