[发明专利]微生物检测质量控制标准物质及其制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种用在微生物检测实验室作质量控制对照，指示微生物检测实验室中检测质量的，定量的微生物标准物质及其制备方法。

背景技术

产品(食品、饮用水、化妆品、医疗用品、生活用品、卫生用品等)和环境中存在大量的微生物(非致病微生物、致病微生物、条件致病微生物、弱毒性致病微生物和强毒性致病微生物等)，由于产品中存在大量的微生物极大多数是繁殖体(正在大量繁殖的微生物)，产品质量监督监测部门和企业内部的实验室，进行检测检测，检测的数据只能表示检测当时的卫生标准。同一产品，不同时间检测，检测的微生物数据均为不一致，有时差异会很大。因此，微生物检测有一个不成文的规定：微生物检测不复检。由于没有一个统一的微生物检测质量控制标准物质，使各系统、各单位的微生物检测实验室对产品等微生物检测时，没有标准物质作同步检测对照，使检测结果成为不确定性。

为了能证明检测质量的准确，只有在微生物检测时，同步进行“微生物检测质量控制标样”检测，当检测的数据符合标定的“微生物检测质量控制标准物质”数据时，才能证明本次微生物检测过程中的各方面的影响因素(技术人员的技能、生物试剂的质量、实验检测环境条件等)得到控制，检测的数据是准确的。同时，每周采用“微生物检测质量控制标准物质”进行检测，绘制质量控制曲线图进行分析、总结，分析微生物检测实验室质量保证体系运行情况，提出整改措施。才能保证该微生物检测实验室的质量体系正常运行。

发明内容

为提供一种微生物检测质量的标准物质，本发明提供以下技术方案。

微生物检测质量控制标准物质的制备方法，包括以下步骤：

a.选择性状稳定、形成集落能识别的、容易保存的、对人和动、植物无毒害的微生物，利用芽孢形成培养基或真菌孢子形成培养基制备细菌芽胞或真菌孢子，

b.用灭菌蒸馏水洗下细菌芽孢或真菌孢子，染色，用灭菌蒸馏水稀释至应用浓度，即内含指示微生物含量为10²～10⁹CFU/0.01G(或片、支、粒)，

c.将定量的己稀释至应用浓度的细菌芽孢或真菌孢子加入到已经环氧乙烷灭菌处理，并已达到无菌要求的定量载体中，均质，达到定量数值的细菌芽胞或真菌孢子均匀结合在载体上，

d.将灭菌后的吸附有定量数值细菌芽胞或真菌孢子的定量载体置于已经灭菌的尖底2ml具塞塑料管中。

步骤a中优选的微生物为嗜热脂肪杆菌芽胞、枯草杆菌黑色变种芽胞、短小杆菌芽胞、蜡样芽胞或白色念珠菌、酵母。

优选步骤a中芽孢形成培养基的配方如下：蛋白胨1.0％、牛肉浸膏粉0.3％、氯化钠0.5％、葡萄糖0.1％、碳酸氢钠0.08％、琼脂粉1.2％。

优选步骤a中真菌孢子形成培养基的配方如下：蛋白胨0.5％、葡萄糖4.0％、玉米淀粉4.0％、吐温80 0.1％、琼脂粉1.0％、碳酸氢钠0.01％。

优选的方案中步骤c中载体可以是不溶性淀粉或可溶性淀粉、磁珠、直径为1～6mm的塑料圆珠、琼脂颗粒、明胶片、50％明胶溶液、直径为6mm的厚滤纸片、葡萄糖、蔗糖、乳糖。

用上述任一种方法制备的微生物检测质量控制标准物质，其特征在于载体上均匀地分布有细菌芽胞或真菌孢子，载体内含指示微生物含量为10²～10⁹CFU/0.01G(或片、支、粒)。

用上述任一种方法制备的微生物检测质量控制标准物质，可用于样品或产品等菌落计数项目检测过程中同步阳性对照。培养基的质量检定。灭菌器灭菌工艺制订及灭菌效果考核、绘制微生物检测实验室内质量控制曲线图及微生物检测实验室室内、室间盲样(技术人员技能)考核。

1、样品(或产品)等菌落计数项目检测过程中同步阳性对照。

在每批(每天)进行样品(产品)等菌落计数检测时，采用“微生物检测质量控制标准物质”进行同步检测，作为阳性对照，判定本次实验结果是否准确和实验过程中存在引起误差的原因。

2、绘制微生物检测实验室内质量控制曲线图。

为了保证微生物实验室的检测质量，每周用“微生物检测质量控制标准物质”进行检测，将检测结果标入质量控制图内，对本微生物检测实验室内存在的影响检测质量的因素进行系统分析，并提出整改意见。

3、用于培养基(营养琼脂)质量检定。