[发明专利]鮟鱇鱼皮中硫酸皮肤素的提取纯化方法

权利要求书

1.鮟鱇鱼皮中硫酸皮肤素的提取与纯化方法，其特征在于以下步骤：

①新鲜鮟鱇鱼皮经水洗后冷冻干燥，组织捣碎后得到干品原料；

②按干品原料与水的重量体积比为1∶20-1∶30计，在干品原料中加入蒸馏水，再加入木瓜蛋白酶与胰酶组成的复合酶，于50-75℃水浴加热提取13-19小时，冷却后离心，得到上清液为硫酸皮肤素粗提液；

③粗提液中加入固体氢氧化钠，再加入硼氢化钠，氢氧化钠与硼氢化钠在粗提液的终浓度分别为0.5mol/L与0.1mol/L，于30-50℃水浴反应20-30小时，离心取上清液，用醋酸调上清液PH值至6.5-7.0；

④加入体积为上清液体积1/3的除蛋白液，该除蛋白液组成按体积比为：正丁醇∶三氯甲烷1∶2.5-1∶4.5，充分摇晃15-30分钟后，室温静置分层，去除下层液体，保留上层清液；

⑤将上层清液按以上步骤④重复操作4次，得到去除蛋白液体；

⑥去除蛋白液体加入两倍体积乙醇，于4℃静置一天，收集沉淀；

⑦将沉淀充分溶于水，离心除去不溶成分，水溶液采用分子量为14000的透析袋除去离子及小分子物质，冷冻干燥后得到纯化的硫酸皮肤素。

2.根据权利要求1所述鮟鱇鱼皮中硫酸皮肤素的提取与纯化的方法，其特征为步骤②中的复合酶的加入量为干品原料重量的1.0-3.5％，复合酶中木瓜蛋白酶与胰酶的重量组成比为1∶1-1∶3。