[发明专利]食物过敏原特异性IgG ELISA检测试剂盒及其制备方法

权利要求书

1.食物过敏原特异性IgG ELISA检测试剂盒，其特征在于该试剂盒组成包括：已包被的奶类、蛋类、肉类、谷物类、坚果类、水果类、蔬菜类、水产类、豆类食物过敏原蛋白的酶标板、人IgG标准液、酶标记抗体、TMB底物显色液、样品稀释液、浓缩洗涤液和终止反应液；

其中：

已包被的奶类食物过敏原蛋白的酶标板包括：牛奶、羊奶；

已包被的蛋类食物过敏原蛋白的酶标板包括：家禽蛋白、家禽蛋黄；

已包被的肉类食物过敏原蛋白的酶标板包括：猪肉、牛肉、羊肉、鸭肉、鸡肉、鹅肉、火鸡肉、驴肉；

已包被的谷物类食物过敏原蛋白的酶标板包括：玉米、小麦、燕麦、大麦、荞麦、大米、小米；

已包被的坚果类食物过敏原蛋白的酶标板包括：杏仁、花生、榛子、腰果、核桃、开心果、巴西坚果、芝麻；

已包被的水果类食物过敏原蛋白的酶标板包括：西瓜、菠萝、橙子、芒果、香蕉、柑桔、胡柚、柠檬、苹果、葡萄、梨、草莓、桃；

已包被的蔬菜类食物过敏原蛋白的酶标板包括：芹菜、菠菜、洋葱、茄子、大蒜、辣椒、土豆、西红柿；

已包被的水产类食物过敏原蛋白的酶标板包括：带鱼、黄鱼、比目鱼、三文鱼；鲤鱼、鲫鱼、草鱼、鲢鱼、虾、蟹、蚌、贻贝、牡蛎、黄鳝、鳗鱼；

已包被的豆类食物过敏原蛋白的酶标板包括：扁豆、蚕豆、黄豆、豌豆；

酶标记抗体：辣根过氧化物酶标记的抗人IgG单克隆抗体；

TMB底物显色液：2.08mmol/L 3，3’，5，5’-四甲基联苯胺，12mmol/L过氧化氢，10mmol/L β-环糊精，0.1mol/L pH5.0的醋酸缓冲液。

样品稀释液：10mmol/L pH7.4-7.6的磷酸盐缓冲液中含1％BSA，0.05％Tween-20和1mg/L庆大霉素；

浓缩洗涤液：0.1mol/L pH7.4-7.6的磷酸盐缓冲液中含1％胎牛血清，0.5％Tween-20和20mg/L庆大霉素；

终止反应液：1.0mol/L H₂SO₄。

2.根据权利要求1所述的食物过敏原特异性IgG ELISA检测试剂盒，其特征在于所说的酶标板为96孔。

3.根据权利要求1所述的食物过敏原特异性IgG ELISA检测试剂盒的制备方法，其特征在于包括如下步骤：

(1)食物过敏原蛋白的制备：将含过敏原蛋白的食物经粉碎、脱脂、提取、SDS-PAGE电泳确证、洗脱、干燥；

(2)酶标记抗体的制备：用辣根过氧化物酶标记纯化的抗人IgG抗体；

(3)配制人IgG标准液、TMB底物显色液、浓缩洗涤液和终止反应液；

(4)酶标板包被：用抗人IgG抗体和食物过敏原蛋白包被酶标板，并封闭。