[发明专利]三叶青的组培快速繁殖方法

权利要求书

1.一种三叶青的组培快速繁殖方法，其特征在于方法的步骤如下：

1)优选完整的腋芽为培养材料，经洗洁精和自来水洗净，置流水下冲洗30～40分钟后，置于75％酒精中处理20～30秒，然后在经0.1％的升汞Hgcl₂消毒6～10分钟后用无菌水冲洗，将腋芽接种于诱导培养基中，诱导培养为MS+BA1.0mg/l或MS+BA1.0mg/l+IBA0.1mg/l；

2)将生长于诱导培养基上外植体转接于MS+BA0.5mg/l+NAA0.05mg/l+PVP0.5g/l、MS+BA0.5mg/l+PVP0.5g/l、MS+KT1mg/l+PVP0.5g/l、MS+KT1.0mg/l+NAA0.05mg/l+PVP0.5g/l或MS+ZT1mg/l+PVP0.5g/l上的培养基上进行增殖培养；

3)将进行增殖培养的高度为3～4公分壮苗转入生根培养基中，生根培养基为1/2MS+NAA0.3mg/l或1/2MS+BA 0.05mg/l+NAA0.3mg/l+GA₃0.2mg/l；

4)将已生根的植株取出，栽培于珍珠岩∶泥炭土为1∶1～2的混合基质上。

2.根据权利要求1所述的一种三叶青的组培快速繁殖方法，其特征在于所述的将腋芽接种于诱导培养基中：将所选取的腋芽接种于诱导培养基中，培养2～3周，看到有许多绿色的芽点和小的不定芽出现，诱导培养基的pH值5.8～6.0，培养温度25～27℃，每天光照时间为16小时，光照强度为35～40μmol.m^-2.s^-1。

3.根据权利要求1所述的一种三叶青的组培快速繁殖方法，其特征在于所述的将生长于诱导培养基上芽转接于增殖培养基上进行增殖培养：培养20～25天，可见小芽可长成3～4公分的无根苗，每个芽的周围有2～6个新芽出现，将丛生芽在无菌条件下取出，用解剖刀分开，置于上述增殖培养基中培养，在20～25天内，各芽再生出一至数个新芽。

4.根据权利要求1所述的一种三叶青的组培快速繁殖方法，其特征在于所述将高度为3～4公分的壮苗转入生根培养基中：首先在黑暗条件下培养2～3天，随后转到光下培养7～10天可诱导形成根，再培养20～25天形成发达的根系。

5.根据权利要求1所述的一种三叶青的组培快速繁殖方法，其特征在于所述的将已生根的植株取出，栽培于珍珠岩∶泥炭土为1∶1～2的混合基质上：将装有生根幼苗的培养容器置于自然温度、光照的环境下锻炼5～7天，然后打开瓶盖，放置1～2天后，将植株基部的琼脂洗净，将苗移栽到珍珠岩∶泥炭土为1∶1的混合基质培养20～35天，开始的10～14天温度为23～25℃，相对湿度为70～80％。