[发明专利]产辅酶Q10新菌株——鞘氨醇单胞菌ZUTE03及其应用有效
申请号: | 200710070806.8 | 申请日: | 2007-08-16 |
公开(公告)号: | CN101177670A | 公开(公告)日: | 2008-05-14 |
发明(设计)人: | 钟卫鸿;柳华贵;金凌;邱乐泉;吴石金;陈建孟;孙柯丹;方建军 | 申请(专利权)人: | 浙江工业大学 |
主分类号: | C12N1/20 | 分类号: | C12N1/20;C12P7/26 |
代理公司: | 杭州天正专利事务所有限公司 | 代理人: | 黄美娟;袁木棋 |
地址: | 310014*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 辅酶 sub 10 菌株 鞘氨醇单胞菌 zute03 及其 应用 | ||
1.产辅酶Q10新菌株——鞘氨醇单孢菌ZUTE03(Spingomonas sp.ZUTE03),保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏日期2007年6月18日,保藏编号CCTCC M.207084。
2.如权利要求1所述的鞘氨醇单孢菌ZUTE03,其特征在于所述鞘氨醇单孢菌ZUTE03特征如下:菌株在牛肉膏蛋白胨琼脂平板上培养1天后呈亮黄润泽,较小,圆形,边缘齐整,表面光滑,易挑起,产黄色素;菌体呈杆状,大小为(0.20~0.36)μm×(0.40~0.80)μm,具极生单根鞭毛,能运动,革兰氏染色阴性,无芽孢;好氧,过氧化氢酶阳性,还原硝酸盐阴性,利用葡萄糖、乳糖产酸,不产生吲哚,最适宜生长温度为28~30℃。
3.如权利要求1所述的鞘氨醇单孢菌ZUTE03在发酵制备辅酶Q10中的应用。
4.如权利要求3所述的应用,其特征在于所述的应用为:以鞘氨醇单孢菌ZUTE03接种于适用于鞘氨醇属菌种的液体培养基,25~28℃下培养24~36h,所得发酵液离心收集湿菌体,湿菌体经皂化提取得到所述的辅酶Q10。
5.如权利要求4所述的应用,其特征在于所述皂化提取为同步皂化提取。
6.如权利要求4或5所述的应用,其特征在于所述适用于鞘氨醇属菌种的液体培养基按如下配方配制:每加入1000mL水加入碳源10~20g、氮源5~15g、KH2PO4 0.5g、Na2HPO4 1.5g、MgSO4 0.5g,pH6.0~8.0。
7.如权利要求6所述的应用,其特征在于所述氮源为硫酸铵。
8.如权利要求6所述的应用,其特征在于所述碳源为葡萄糖。
9.如权利要求6所述的应用,其特征在于所述适用于鞘氨醇属菌种的液体培养基按如下配方配制:每加入1000mL水加入葡萄糖15g、硫酸铵10g、KH2PO4 0.5g、Na2HPO4 1.5g、MgSO4 0.5g,pH8.0。
10.如权利要求5所述的应用,其特征在于所述皂化提取按如下步骤进行:将湿菌体2g移入容器内,加入0.3~0.7g焦性没食子酸,1~2.5g KOH,10~20ml甲醇,3~7ml蒸馏水,混匀,同时加入C5~C10的烷类试剂30~70ml,在70~90℃水浴锅中回流,皂化并同步萃取产物30~60min,迅速冷却至室温,倒入分液漏斗,剧烈振荡后静置分层取上层有机相,于旋转蒸发仪50℃下将其浓缩至5~10ml,后放入冰箱冷冻,析出胆固醇,过滤,取滤液,即得辅酶Q10溶液。
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