[发明专利]一种袋鼠花组培快繁的方法

权利要求书

1.一种袋鼠花组培快繁的方法，其特征在于：该方法按以下步骤进行：

1)、培养基的配制，包括基本培养基及分别适用于不同组培阶段的培养基组成，基本培养基与各阶段培养基添加物含量为：

(1)基本培养基：MS或3/4MS或1/2MS，其中蔗糖或白糖20～30g/L，琼脂7～9g/L，pH5.8；

(2)诱导培养基：MS+6-BA2～5mg/L+IAA0.1～0.5mg/L+活性炭1～3g/L；

(3)增殖培养基：MS+6-BA1～3mg/L+IAA0.1～0.3mg/L+活性炭1～3g/L；

(4)壮苗培养基：3/4MS+6-BA0.5～2mg/L+IAA0.05～0.2mg/L+活性炭1～3g/L；

(5)生根培养基：1/2MS+NAA0.1～1.0mg/L+活性碳1～3g/L；

2)、外植体的选取：选择长势、开花性状均表现良好，具有繁育品种典型性状的袋鼠花植株作为外植体来源，在分蘖生长旺盛季节，晴天早晨的9点～10点取高10～20cm、健壮、无病虫害的幼嫩侧芽作为外植体材料；

3)、外植体预处理：将取得的幼嫩侧芽，剥去外叶，剪去上部叶片，整理成1.0～1.5cm长的外植体，在加有体积比为1％洗洁精的自来水中漂洗，然后再用自来水冲洗20～40min；

4)、外植体灭菌：将预处理过的材料，先用体积比为75％的酒精浸泡0.5～1.0min，用无菌水冲洗1次，再用体积比为2％的次氯酸钠水溶液灭菌10～15min，最后用无菌水冲洗3～5次；

5)、诱导培养：将灭菌处理后的外植体放在灭菌过的滤纸上吸干水分，用解剖刀再剥去外叶，切去上部叶，留0.3～0.6cm长的外植体，接入诱导培养基上进行诱导培养，外植体诱导培养20～30天后，诱导出幼芽；

6)、增殖培养：待幼芽长到1～5cm时，转接到增殖培养基上进行增殖培养，培养30～45天分化出丛芽；每隔30～45天，将分化的丛芽切成单株再接种在增殖培养基上，再分化出丛芽；

7)、壮苗培养：将分化出的丛芽切成单株接种到壮苗培养基上，20～30天后，幼苗株高生长达2～5cm；

8)、生根培养：将生长达2～5cm丛芽切成单株接种到生根培养基上，20～30天后，幼苗基部长出数根根系；

9)、组培苗的驯化与移栽：当生根培养20～30天时，将生长达3～7cm以上的生根幼芽，移至常温下适应3～5天后，打开盖子再适应3～5天，洗清根部培养基后移栽入装有泥炭：珍珠岩：蛭石的体积比为4∶2∶1基质的穴盘中，最后浇一次透水。

2.根据权利要求1所述的袋鼠花组培快繁的方法，其特征在于：所述的外植体灭菌是外植体预处理后洗净的幼芽，先在含有体积比为10％的柠檬酸和体积比为15％的抗坏血酸的混合溶液中浸泡0.5～1小时，再用体积比为75％的酒精浸泡0.5～1.0min，用无菌水冲洗1次，再用体积比为2％的次氯酸钠水溶液灭菌10～15min，最后用无菌水冲洗3～5次。

3.根据权利要求1所述的袋鼠花组培快繁的方法，其特征在于：所述的培养基，包括基本培养基和组培各阶段培养基的各组分与每升所含重量为：

(1)基本培养基：MS或3/4MS或1/2MS，其中蔗糖或白糖20～30g/L，琼脂7～9g/L，pH5.8；

(2)诱导培养基：MS+6-BA3mg/L+IAA0.1mg/L+活性炭3g/L；

(3)增殖培养基：MS+6-BA2mg/L+IAA0.1mg/L+活性炭1g/L；

(4)壮苗培养基：3/4MS+6-BA1.0mg/L+IAA0.1mg/L+活性炭1g/L；

(5)生根培养基：1/2MS+NAA0.3mg/L+活性碳1g/L。

4.根据权利要求1或3所述的袋鼠花组培快繁的方法，其特征在于，所述的各组培阶段的培养条件是：在诱导培养阶段：温度22±2℃、暗培养；在增殖培养、壮苗培养和生根培养阶段：温度25±2℃、光照12h/d、光照强度为2000lx～3000lx。