[发明专利]一种降低免疫细胞表面抗原位点免疫原性的方法及应用

说明书

技术领域

本发明涉及生物技术，主要涉及降低免疫细胞表面MHC-II抗原位点免疫原性的方法，可在排斥反应中的应用。

背景技术

通过组织，细胞或者器官的移植，来代替丧失功能的组织，细胞和器官是现代医学治疗的重要手段之一。提供移植物的个体称作供者，而接受移植物的个体称为受者。根据供者和受者的组合，可以有以下三种移植类型：自体移植，是指把来自移植受者本身的组织或者器官移植给受者。同种同基因移植，是指遗传结构完全相同或非常相似的个体之间的移植。同种异基因移植，是指同一动物种内遗传结构不同个体之间的移植。异种移植，是指不同动物种的个体之间的移植，如猪与人之间的移植。前两种的移植不会发生排斥反应。当前，无论是从国际还是国内的具体实情出发，同种异基因移植(同种异源移植)是临床上主要的也是可行的移植方法。研究表明，在同种异基因移植中，受者对移植物的排斥是移植成功的主要障碍，而发生排斥反应的主要机理也已经得到学界的共识，即是由受者T细胞介导的，针对同种异型抗原的免疫应答。

目前，接受器官移植的患者正在逐年增加，但是移植后器官的急性排斥反应的发生率很高，影响了移植的成功率和患者的存活率。现有的抗免疫排斥反应的主要方法仍依赖于各种免疫抑制剂，不仅价格昂贵，而且由于免疫抑制作用，感染，肿瘤的发生机会也明显增加。另外，通过依靠体外培养，冷冻，外部放射疗法，动物过继移植等手段来降低移植物免疫原性从而延长移植器官生存时间的方法取得了一定的效果，但在器官移植中却并无实际的应用价值，例如，外放射疗法使供器官内外接受的发射线往往不均匀，计量过小达不到预期效果，计量过大则可能对供器官造成广泛损害。因此，迄今为止，尚未找到临床使用性强且确切有效的手段。

20世纪发现，在不同种属或同种不同系别的个体间进行组织移植时，会出现排斥反应，其本质是细胞表面的同种异型抗原诱导的一种免疫应答。这种代表个体特异性的同种异型抗原称移植抗原或组织相容性抗原，其中能引起强而迅速排斥反应的抗原称主要组织相容性抗原，引起较弱排斥反应的抗原称次要组织相容性抗原。主要组织相容性抗原是一个复杂的抗原系统，编码这一系统的基因位于同一染色体片段上，是一组紧密连锁的基因群，称为主要组织相容性复合体(major histocompatibility complex，MHC)。不同种属的动物其MHC有不同的命名，如小鼠的MHC称H-2复合体，猪的MHC称SLA复合体，人的MHC称HLA复合体等。MHC基因包括经典MHC-I和MHC-II基因，分别合成MHC-I和MHC-II类分子抗原，其在分子结构，组合分布和功能上有各自特点。I类分子由重链和βm链组成，分布于所有有核细胞表面，主要识别和提呈内源性抗原肽，与辅助受体CD8⁺细胞结合，对CTL细胞的识别起限制作用。II类分子由a链和β链组成，仅表达于淋巴样组织中的各种细胞表面，如专职抗原提呈细胞(包括B细胞，树突状细胞，巨噬细胞等)，胸腺上皮细胞和活化的T细胞等，主要识别和提呈外源性抗原肽，与辅助受体CD4⁺结合，对Th的识别起限制作用。

MHC分子抗原参与T细胞介导的免疫排斥应答途径有两条：一直接识别途径，受者T细胞直接识别移植物上的由供者APC细胞提呈的完整的同种异型MHC分子和肽的复合物，是急性移植排斥反应的主要原因。二间接识别途径，受者T细胞识别由受者APC提呈和加工处理后的从移植物上脱落的供者的同种异型MHC分子肽和受者MHC分子的复合物，与慢性排斥有关。

动物实验证实：导致急性移植免疫排斥反应发生的抗原-MHC-II类分子主要是来自移植物中的过客白细胞，其中主要是成熟的树突状细胞，成熟的淋巴细胞和单核巨噬细胞，同时在血管内皮细胞表面和部分的T淋巴细胞表面也有表达，实验中在移植前把携带MHC-II的细胞去除，能使MHC-I错配的移植物排斥减慢减轻，甚至不发生，而重新输入携带MHC-II类分子的供者细胞能重建排斥反应，其机制在于携带同种异型MHC-II分子的过客白细胞能激活受者CD4⁺Th细胞，活化的Th细胞分泌细胞因子，辅助同种异型应答的CD8⁺CTL细胞充分生长和分化，从而激发排斥反应。如在移植前除去过客白细胞，则同种异型应答的CD8⁺CTL难以扩增和分化，排斥反应就减弱，因此，应用抗MHC-II单抗可以定向的和靶细胞表面的MHC-II抗原相结合，下调供体的免疫原性，有效降低移植术后发生排斥反应的机会。