[发明专利]籽粒富铁/锌和尼克酰胺的转基因农作物的培育法及应用

权利要求书

1.一种籽粒富铁/锌和尼克酰胺的转基因农作物的培育方法，其特征是包括以下步骤：

1)、选用尼克酰胺合成酶基因，选用胚乳特异表达基因的启动子和终止子；

2)、胚乳特异表达转基因载体的构建：

所述胚乳特异表达基因的启动子、尼克酰胺合成酶基因与常用的植物表达用终止子正向串联连接，得到农作物胚乳过量表达NAS基因的基因表达框；从而获得转基因载体；

3)、转基因农作物的培育：

通过转基因培育法获得转基因农作物。

2.一种籽粒富铁/锌和尼克酰胺的转基因农作物的培育方法，其特征是该农作物为水稻，包括以下步骤：

1)、选用水稻尼克酰胺合成酶基因OsNAS1，该基因具有SEQ ID NO：1所示的核苷酸序列；选用水稻谷蛋白合成酶基因启动子pGluB-1，该基因启动子具有SEQ ID NO：2所示的核苷酸序列；选用根癌农杆菌胭脂碱合成酶基因终止子Tnos，该终止子具有SEQ ID NO：3所示的核苷酸序列；

2)、胚乳特异表达转基因载体的构建：

水稻谷蛋白合成酶基因启动子pGluB-1、水稻尼克酰胺合成酶基因OsNAS1与根癌农杆菌胭脂碱合成酶基因终止子Tnos正向串联连接，得到水稻胚乳过量表达NAS基因的基因表达框；从而获得转基因载体pLU14；

3)、转基因水稻的培育：

通过转基因培育法获得转基因水稻NASE-9。

3.根据权利要求2所述的籽粒富铁/锌和尼克酰胺的转基因农作物的培育方法，其特征是所述步骤2)：在双元载体pTF101.1的多克隆位点，利用酶切连接方法插入水稻谷蛋白合成酶基因启动子pGluB-1和根癌农杆菌胭脂碱合成酶基因终止子Tnos，得到中间载体pLU10；然后在中间载体pLU10的pGluB-1启动子和Tnos终止子之间正向插入水稻尼克酰胺合成酶基因OsNAS1，得到转基因载体pLU14。

4.根据权利要求3所述的籽粒富铁/锌和尼克酰胺的的转基因农作物的培育方法，其特征是所述步骤3)：将转化了pLU14载体的农杆菌EHA101侵染粳稻品种“秀水110”的愈伤组织，经过转基因的共培养、选择、分化、生根步骤获得转基因水稻NASE-9。

5.按照权利要求1～4中任意一种方法获得的转基因农作物的用途，其特征是：将该种转基因农作物所得的籽粒作为食品添加剂，加入到食物或饲料中；从而提高食物或饲料的铁吸收率。

6.根据权利要求5所述的转基因农作物的用途，其特征是：每1kg食物中添加0.2～1kg的食品添加剂，每1kg饲料中添加0.1～0.25kg的食品添加剂。