[发明专利]同时检测乙型肝炎病毒基因亚型和耐药突变的试剂盒及方法

权利要求书

1.同时检测乙型肝炎病毒基因亚型和耐药突变的试剂盒，其特征在于所述试剂盒包括：

1)特异性扩增乙型肝炎病毒基因或转录本的引物，其碱基序列如SEQ ID NO：1和SEQ ID NO：2所示；

2)乙型肝炎病毒基因亚型特异性寡核苷酸探针，其碱基序列如SEQ ID NO：3、SEQ ID NO：4和SEQ ID NO：5所示；

3)乙型肝炎病毒耐药突变特异性寡核苷酸探针，其碱基序列如SEQ ID NO：6、SEQ ID NO：7、SEQ ID NO：8、SEQ ID NO：9、SEQ IDNO：10、SEQ ID NO：11、SEQ ID NO：12、SEQ ID NO：13、SEQ ID NO：14、SEQ ID NO：15、SEQ ID NO：16和SEQ ID NO：17所示；

上述所有序列可由其碱基互补序列替换。

2.根据权利要求1所述的同时检测乙型肝炎病毒基因亚型和耐药突变的试剂盒，其特征在于所述寡核苷酸探针固定在基质上。

3.根据权利要求1所述的同时检测乙型肝炎病毒基因亚型和耐药突变的试剂盒，其特征在于所述寡核苷酸探针固定在尼龙膜上。

4.根据权利要求1所述的同时检测乙型肝炎病毒基因亚型和耐药突变的试剂盒，其特征在于所述引物标记生物素。

5.同时检测乙型肝炎病毒基因亚型和耐药突变的方法，包括以下步骤：

1)制备血清，提取乙型肝炎病毒DNA；

2)以步骤1)所得DNA为模板，利用权利要求1所述特异性扩增乙型肝炎病毒基因或转录本的引物进行PCR扩增；

3)上述PCR产物与固定在基质上的权利要求1所述探针序列杂交；

4)洗膜及显色。