[发明专利]一种常压干燥法生产活性乳酸菌粉的技术

说明书

技术领域：本发明属人类生活需要类有关食品制备或处理的技术领域，具体地说是从糟辣椒、泡菜、酸奶等发酵制品分离出纯优良乳酸菌株组合，采用常压干燥法生产活性乳酸菌粉的技术方法。

背景技术：乳酸菌具有多种活性酶，并能产生特殊的抗菌物质，因此乳酸菌制品广泛用于食品，保健品和医疗制品等各方面，乳酸菌的制备方法也很多，根据不同的用途从不同的发酵制品中筛选分离出优良菌株而制成乳酸菌制品，乳酸菌制品生产一般经过三个步骤：1.筛选分离出优良菌株，扩大培养成优良菌种；2.将菌种存放在载体上加工成乳酸菌制品；3.乳酸菌制品的保存。

由于活性乳酸菌仅存在液体食品或饮料中，因此，乳酸菌种一般存放在脱脂牛乳中，经真空冷冻干燥后在低温下保存，而将菌种存放在固体干料中的极少，也就是说以固体干料为乳酸菌载体的报导极少，发明专利《活性乳酸菌干燥菌粉的制备技术》，申请号00119386.4，就是以固体干料为乳酸菌载体的报导之一，但其保存仍在低温情况下(10℃以下)，而且其生产目的仍是作食品添加剂，因此对菌种的的发酵或生产性能不作苛求。

发明内容：本发明的目的在于从品质良好的自然乳酸发酵制品中筛选分离出纯优良菌株组合，经特殊方法扩大培养成优良纯菌种，不含任何杂菌，将纯菌种存放在固体干料中，经高温驯化后于50℃-70℃温度下干燥，并能在常温状态下作较长期的保存。

为实现上述目的，本发明研制出一个完整的常压干燥法生产活性乳酸菌粉的工艺流程，并根据试验提出了主要工艺参数。

本发明工艺流程见说明书附图，依次为1.菌种提取分离，2.菌种培养，3.高温驯化，4.高温驯化后菌种扩大培养，5.混合，6.干燥，7.包装；

现结合工艺流程图对流程中的每一步骤的具体操作和工艺条件加以详细说明。

(1)菌种提取分离：取品质良好的自然乳酸发酵制品，如糟辣椒或泡菜或酸奶，取其中10g放置于蒸馏水中稀释1000-10000倍，蘸取稀释液用划线法与酒精灯下在平板上MRS固体培养基表面划线，将划线后的固体MRS培养基放置于37.5℃培养箱培养12h-36h，观察培养基上菌体形态，将培养基上形态不同的菌体再次用上述方法再分别在有MRS固体培养基的平板上划线培养。依次类推，直至培养基上的菌种均为纯种为止；

(2)菌种培养：将纯菌种在无菌操作室，于酒精灯下，用划线法转接于MRS固体培养基，放置于无氧培养箱36.5℃-38.5℃条件下培养12h-36h；

(3)高温驯化：

①：驯化前菌种扩大培养：将菌种转接于含有MRS液体培养基、保护剂和粮食熬煮液的驯化培养基上，放置于35℃-40℃培养箱无氧条件下培养，培养时间为12h-36h；

②高温阶梯驯化：将生长良好的菌种在无菌条件下转接于空白驯化培养基中，放于40℃培养箱无氧条件培养12h～36h。然后将长势好的菌株转接于另一空白驯化培养基上，放于45℃培养箱无氧条件培养12h～36h，依次递增培养温度5℃，最终在无氧条件下于65℃仍然能生长的菌种为目的菌种；

(4)驯化后菌种扩大培养：将在65℃仍然能正常生长的菌种无菌条件下接种至灭菌后的粮食熬煮液中在35℃-40℃温度下培养12h-36h；

(5)混合：上述驯化扩大培养的粮食熬煮液与熟化后干粮食粉载体按1∶1的比例混合，并添加混合物重量2％-3％的保护剂海藻糖和混合物重量2％-4％赋形剂海藻酸纳，搅拌混匀；

(6)干燥：将上述混合物放于50℃-70℃烘箱或烘房中烘干，干燥时间12h-36h；

(7)包装：将烘干后的混合物，用复合薄膜进行真空包装，真空度为0.085Mpa-0.095Mpa；

MRS固体培养基是一般通用的培养基，

MRS固体培养基的制法是：取牛肉蛋白粉10g、牛肉浸膏10g、酵母浸膏5g、葡萄糖20g、醋酸钠5g、柠檬酸二铵2g、吐温80 0.1ml、硫酸镁0.58g、硫酸锰0.28g、纯化琼脂粉15g、  蒸溜水1000ml混合，用高压锅在121℃灭菌20min-30min，调节pH6.2～6.4，倒于平板上，待MRS冷凝固化后，成MRS固体培养基。

在配制MRS固体培养基的原料中，如果不加纯化琼酯粉，则加工出的MRS培养基称MRS液体培养基，在MRS液体培养基中加入保护剂和粮食熬煮液称驯化培养基。

本发明所指的划线法是指蘸取菌种在培养基表面呈S形曲线划动，新长出的菌落呈S曲线状。

本发明所指的驯化培养基是指在MRS液体培养基中加有保护剂海藻糖和粮食熬煮液的培养基。