[发明专利]西尼罗病毒的引物和探针及一步法实时RT－PCR检测试剂盒有效
| 申请号： | 200710092783.0 | 申请日： | 2007-09-29 |
| 公开（公告）号： | CN101245394A | 公开（公告）日： | 2008-08-20 |
| 发明（设计）人： | 谢鹏;曾志磊;陈晓 | 申请（专利权）人： | 谢鹏;曾志磊 |
| 主分类号： | C12Q1/70 | 分类号： | C12Q1/70;C12Q1/68;C12N15/11 |
| 代理公司： | 重庆市恒信知识产权代理有限公司 | 代理人： | 刘小红 |
| 地址： | 400016重庆市渝中区医学*** | 国省代码： | 重庆;85 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 西尼罗 病毒 引物 探针 一步法 实时 rt pcr 检测 试剂盒 | ||
1.一种西尼罗病毒一步法实时RT-PCR检测试剂盒，其组成包括：One StepRT-PCR Master Mix、标准品RNA、内参RNA、Primer & Probe Mix、逆转录酶和水；其中所述的Primer & Probe Mix包括以下针对西尼罗病毒的引物和探针的混合物：
(1)西尼罗病毒的上游引物，其核苷酸序列为SEQ ID NO1；
(2)西尼罗病毒的下游引物，其核苷酸序列为SEQ ID NO2；
(3)西尼罗病毒的TaqMan探针，其核苷酸序列为SEQ ID NO3；
(4)内参RNA的TaqMan探针，其序列为SEQ ID NO4。
2.根据权利要求1所述的一种西尼罗病毒一步法实时RT-PCR检测试剂盒，其特征在于，所说的One Step RT-PCR Master Mix为含RT-PCR缓冲液、Mgcl2，dNTPs、DNA聚合酶和无RNA酶水的混合液；其中DNA聚合酶为热启动Taq DNA聚合酶。
3.根据权利要求1所述的一种西尼罗病毒一步法实时RT-PCR检测试剂盒，其特征在于，所说的标准品RNA序列为SEQ ID NO5。
4.根据权利要求1所述的一种西尼罗病毒一步法实时RT-PCR检测试剂盒，其特征在于，所说的内参RNA序列为SEQ ID NO6。
5.根据权利要求1所述的一种西尼罗病毒一步法实时RT-PCR检测试剂盒，其特征在于，所说的水为无RNA酶水。
6.根据权利要求1所述的一种西尼罗病毒一步法实时RT-PCR检测试剂盒，其特征在于，试剂盒中各组分的量为：2×One Step RT-PCR Master Mix1.25ml/管、各浓度梯度的标准品RNA冻干管共6管、内参RNA冻干管1管、5×Primer & Probe Mix1.0ml/管、逆转录酶MMLV 80ul/管和无RNA酶水10ml/瓶。
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