[发明专利]水苏糖含量快速检测技术

说明书

技术领域

本发明涉及水苏糖快速检测技术。具体讲涉及通过高效液相色谱技术(HPLC)对水苏糖提取原料中的水苏糖含量进行快速检测的技术。涉及化学检测技术领域。

背景技术

水苏糖(Stachyose)属于棉子糖属半乳糖苷类非还原性功能性低聚糖。它能显著促进双歧杆菌增殖，被誉为“超强双歧因子”；另外，水苏糖还能促进肠内短链脂肪酸的增加，降低肠内pH值，维持肠道内微生态平衡，抑制病原腐败菌的生产，并能促进肠道对钙、镁等微量元素的吸收；它还兼有调节免疫、降血糖和降血脂(胆固醇)功能；还可做低甜度的甜味剂和营养物质。水苏糖物化性质稳定和生理功能广泛，且经毒理学实验证实安全可靠，可广泛应用于医药保健、食品、化妆品、饮料、酒、饲料类等领域中，开发潜力巨大。

提取水苏糖的主要工业原料为大豆、草石蚕、地灵等，水苏糖在不同植物中含量差别较大，大豆中水苏糖含量一般为5％-8％；草石蚕中水苏糖含量为10％-15％；地灵中水苏糖含量为20％-40％。不同栽培条件和地理环境水苏糖含量差别也较大。

水苏糖含量快速检测在水苏糖产业化开发中具有重要价值和应用意义，水苏糖生产企业与水苏糖原料生产企业或农户合作时，目前没有准确、快速的检测技术，收购价格难以确定，限制了产业的发展，

目前水苏糖快速检测技术研究在国内外尚属空白，一些生产企业采用棉子糖的检测技术，由于水苏糖与棉子糖结构上的不同，HPLC检测的色谱条件存在较大差异，造成检测结果不可靠。

发明内容

本发明的目的是建立水苏糖高效液相色谱(HPLC)快速检测技术。

本发明的内容包括以草石蚕为原料，通过索氏提取法快速提取水苏糖，确定高效液相色谱技术的色谱条件，建立水苏糖快速检测技术体系。

本发明建立水苏糖快速检测技术体系，检测时间短，结果可靠，是适于水苏糖生产企业检测原料中水苏糖含量的成熟技术。

(1)从草石蚕中提取水苏糖的索氏提取条件为：70％乙醇于65℃-85℃水浴，索氏提取提取时间为2.5-4h。

(2)HPLC检测色谱条件为：色谱柱：Agilent Eclipse XDB C8柱(5μm，4.6×150mm)；流动相为以下配方选基一：乙睛：醋酸缓冲液＝23：77；乙睛：醋酸缓冲液＝30：70；乙睛：醋酸缓冲液＝25：75；温度：25-35℃；流速：1-2mL/min；波长：260nm。

本发明解决技术问题的方案分以下三个步骤完成：

(1)草石蚕中水苏糖索氏提取：称取100g草石蚕鲜样，研碎，将样品装入滤纸套筒中，把套筒小心地插入索氏提取器中，取300mL 70％乙醇加入600mL平底烧瓶中，加入几粒沸石。水浴加热65℃-85℃，连续提取2.5-4h后，提取液颜色较淡，待溶液刚刚虹吸流回烧瓶时，立即停止加热，收集提取液，以盐酸中和。

(2)样品提纯：提取液加热至70℃后经2％(w/v)活性炭脱色，搅拌30min，静置后以3 000r/min离心10min后收集上清液，再用1/5体积的10％三氯乙酸除蛋白，以3 000r/min离心去除变性蛋白，上清液真空蒸发浓缩。浓缩后的残渣以200mL 70％乙醇沉淀，3 000r/min离心后取上清液真空浓缩至30mL。

(3)HPLC检测：样品处理方法：1％醋酸水溶液99mL，加入1ml浓缩液，搅拌混匀后，取20μL做HPLC分析。

具体实施方式：

在下面的实施例中进一步说明了本发明，这并不限制本发明的范围。

实施例1