[发明专利]高纯度甘露聚糖肽的制备方法

权利要求书

1.一种高纯度甘露聚糖肽的制备方法，其特征在于，该制备方法包括如下步骤：

(1)制备发酵产物：α-溶血链球菌H₁S-33号菌的深层发酵液，经灭活、浓缩、乙醇沉淀得到含有甘露聚糖肽的发酵产物；

(2)提取及粗品的制备：发酵产物加3～10倍量(W/V)的纯化水，在搅拌下进行提取，然后用三氯乙酸调节pH1.5～3.5，静置、除去沉淀物，清液在搅拌下加浓度90％以上乙醇至40％～80％乙醇浓度，静置，分离沉淀；沉淀物加纯化水按步骤(2)反复溶解、沉淀，干燥得甘露聚糖肽粗品；

(3)大分子甘露聚糖肽的分离：用截留10～30万分子量的滤膜滤除甘露聚糖肽粗品中的大分子甘露聚糖肽，滤液用截留1～5万分子量的滤膜进行浓缩处理，得甘露聚糖肽水溶液；

(4)大分子甘露聚糖肽的水解：将大分子甘露聚糖肽用溶菌酶、淀粉酶和纤维素酶中任意一种或者用盐酸、磷酸、乙酸和氢氟酸中任意一种进行水解。

2.根据权利要求1所述一种高纯度甘露聚糖肽的制备方法，其特征在于，所述步骤(4)中酶水解的步骤如下：大分子甘露聚糖肽用5～20倍量(W/V)的纯化水溶解，调整pH6.0～8.0，按500～100000U/g的量加入所述溶菌酶、淀粉酶和纤维素酶中任意一种，20～60℃保温4～20小时，加热至沸，冷却至室温，调整pH2.0～3.0，滤过，得甘露聚糖肽水溶液。

3.根据权利要求1所述一种高纯度甘露聚糖肽的制备方法，其特征在于，所述步骤(4)中酸水解的步骤如下：大分子甘露聚糖肽用5～20倍量(W/V)浓度0.5～5％盐酸、磷酸、乙酸和氢氟酸中任意一种溶液溶解，加热60～105℃并保温0.5～8小时，冷却，调整pH值中性，得甘露聚糖肽水溶液。

4.根据权利要求1至3任意所述一种高纯度甘露聚糖肽的制备方法，其特征在于，将步骤(3)和步骤(4)所得甘露聚糖肽水溶液混合，过滤至清，用浓度50～80％乙醇沉淀，静置、分离沉淀物，干燥。

5.根据权利要求1至3任意所述一种高纯度甘露聚糖肽的制备方法，其特征在于，将步骤(3)和步骤(4)所得甘露聚糖肽水溶液混合，用5～20倍量(W/V)的蒸馏水溶解，按0.1～5％(重量)的比例加入活性炭，70～100℃保温10～60分钟，冷却、滤过，清液用浓度50～80％乙醇沉淀，静置、分离沉淀物，干燥。