[发明专利]从茶叶中制备甲基化儿茶素的工艺方法

说明书

技术领域

本发明涉及从天然产物中制备活性成分的方法，具体地说，涉及从茶叶中提取甲基化儿茶素的工艺方法。

背景技术

二十世纪90年代末期，日本科学家最早成功从台湾冻顶乌龙茶中分离鉴定出两种具有抗过敏功能的新型儿茶素衍生物，经分离、纯化后鉴定证明其分子结构分别为(-)-表没食子儿茶素3-O(3-O-甲基)没食子酸酯(C-1)和(-)-表没食子儿茶素3-O(4-O-甲基)没食子酸酯(C-2)。为白色粉末状物质，易溶于水和有机溶剂，其结构式如式(1)所示：

                  R₁     R₂

EGCG              H      H

EGCG3″Me         CH₃    H

EGCG4″Me         H      CH₃

EGCG3″Me和EGCG4″Me对抗过敏，尤其是抗花粉症过敏具有非常显著的功效。花粉症是变态反应中最具代表性的，其发病率逐年升高，尤其是二十世纪八十年代以后其发病率迅速升高，已经成为世界性卫生问题。WHO于1997年将之列为“二十一世纪重点研究和预防的疾病”。但是，甲基化儿茶素仅在极少数的中叶种茶树品种中存有，所以该项研究受到日本业界高度重视，小川制药、太阳制药、三井农林等几大公司均投以重金，加紧秘密研发。因甲基化儿茶素对治疗花粉过敏等过敏反应症有极其显著的效果，抑制小鼠皮肤被动过敏反应的效果是EGCG的两倍，已被视为人们期待已久的抗过敏症材料。随着甲基化儿茶素的功能研究逐步得到权威机构的认可，其相关方面的研究也逐步得到国际学术机构的高度重视。目前，甲基化儿茶素的提取与分离纯化技术的前沿研究主要集中在日本，受商业秘密的保护，甲基化EGCG的提取与分离纯化技术方法尚未见到报导。

目前，工业化提取儿茶素的方法主要是溶剂萃取法和离子沉淀法，溶剂萃取法是目前最广泛采用的方法，该方法工艺成熟稳定，提取率较高，但生产时使用多种有机溶剂，且用量大，有些甚至是有毒溶剂(如氯仿)，因而很难为食品和医药等行业所接受。离子沉淀法减少了有机溶剂的使用量，生产的儿茶素纯度高，但工艺操作要求较高，需严格控制pH值，否则儿茶素可能会氧化，同时，工艺中大量使用酸碱液，废渣处理量大，容易造成环境污染。其次，还有几种提取技术正处于试验阶段：(1)超临界流体萃取技术，该技术是一种新型的提取天然物质的分离技术，具有低能耗、无污染、高分离能力、质量好、速度快等优点，这些特点迎合崇尚纯天然的发展潮流，但设备要求高，一次性投资大，对于提取儿茶素来说，超临界CO₂提取效果不是很好，而超临界萃取剂、助溶剂在超临界状态下的溶解度等研究尚未成熟，因此很难进入规模化大生产；(2)吸附树脂法提取儿茶素工艺简单，能耗少，树脂再生容易，可反复利用，提取效率高，提取过程无污染，符合环保要求，条件温和，不会破坏儿茶素活性，具有良好的发展前景。但关键问题在于怎样找到一种对儿茶素吸附能力强、解吸容易的树脂。儿茶素单体制备方法主要有凝胶层析法、HPLC制备以及高速逆流色谱法等技术，前两种技术操作繁琐、耗时长、设备材料昂贵，高速逆流色谱则具有适应性好、操作简单、回收率高、重现性好、分离效率高、分离量大等特点，因而具有良好的应用和开发价值。

发明内容

本发明的目的在于提供一种从茶叶中提取、分离、纯化甲基化儿茶素的工艺方法，以得到高纯度的甲基化儿茶素。

为实现上述目的，本发明的技术方案如下：

制备步骤1、先将茶鲜叶萎凋5～12小时，进行滚筒杀青处理，然后在80～120℃条件下干燥，经粉碎机制成颗粒大小为60～80目的茶粉。