[发明专利]一种基于狭槽器件的多元待测物检测方法及其检测装置

说明书

技术领域

本发明涉及一种多元待测物检测方法及其检测装置，特别涉及一种基于透明狭槽器件 的多元待测物非均相检测方法及其检测装置。

背景技术

多元待测物检测(Multi-Analyte Analysis，MAA)指通过一次加样、一次分析同时对二 种或二种以上待测物进行测定(定性、定量或半定量)的分析方法。同传统的生物分析相比， MAA的优越性主要体现在提高了分析效率、简化了分析过程和降低了分析成本等三个方 面。通过MAA，可以在较短的时间内为临床诊断或科学研究提供更多有价值的信息。

MAA在临床诊断、药物筛选、环境保护、毒物检测、血液筛查等方面均有广泛的应 用价值。例如，对前列腺癌的诊断，fPSA/tPSA联合检测可以有效改善临床灵敏性和特异 性；对于血检，采用MAA方式对HCV抗体/HIV抗体/HBsAg/TP抗体进行联合检测将大大提 高血检效率，而同时检测HIV/HBV/HCV三种病原体的DNA/RNA将有效降低窗口期 HIV/HBV/HCV感染。由于MAA广泛的应用价值，长期以来一直是临床检验中研究十分活 跃的领域。

根据实施方式的不同，MAA一般可分为多探针信号识别法和单一探针空间识别法。 多探针信号识别法研究较早[Clin.Chem.，1986，32，887-890；Clin.Chem.，1985，31，2014- 2017；Clin.Chem.，1986，32，2191-2194；1982，28，1469-1473]，现已有成型的商品试剂盒 [Clin.Chem.，2006；52：235-239]。同多探针信号识别法相比，单一探针空间识别法无须区 分不同标记物信号，完全避免了不同标记物信号之间的相互干扰，更容易制备高活性的固 相试剂，各试剂之间相容性及质控问题的处理也相对简单，因此更有利于建立灵敏、准确、 测量范围宽阔的MAA方法。

单一探针空间识别法的实施方式灵活多变，比较成熟的技术主要运用于斑点试验[J. Clin.Microbiol.，Mar 1993；31：717-719]、免疫层析[J.Clin.Microbiol.，Jul 2001；39：2572- 2575]等“简易”的免疫分析装置及芯片检测装置；Kakabakos SE等以稀土螯合物BCPDA 为标记建立的MAA也采用了类似原理[Clin Chem.，1992；.38：338-342]：将四种分别抗LH、 HCG、FSH、催乳素的单克隆抗体分别包被四个微池，封闭后将微池的上端截去，成为四 个较浅的微池；将四微池底部粘于塑料条的二面(每面二个)制成微池条；将5个微池条分别 置于5个试管，在5个试管中分别加入校准品(或样品)和生物素化抗体，温育并洗涤后，加 入检测试剂SBMC，再次温育并洗涤后，将微池条取出，干燥后测量荧光。该方法可同时 检测LH、HCG、FSH、催乳素，四种待测物的分析都具有良好的灵敏度和精密度，但需 用较大量的样品和检测试剂，操作非常繁琐。

发明内容

本发明的目的是提供一种基于狭槽器件的多元待测物非均相检测方法及其检测装置， 主要解决现有多元待测物检测实施难度大、操作繁琐、检测灵敏度与准确性低等技术问题。 本发明通过一种简单装置方便地实施MAA。该方法既保持了常规非均相生物分析的高度 灵敏性和特异性，又在标记物分离、结合反应的促进、本底校正、信号测量、自动化难易 程度等方面具有常规非均相生物分析所不具备的优点，因此可简便、有效地实现MAA； 同时，对于单一待测物的检测，本发明所述装置也比常规非均相生物分析更具方法学优势。

本发明的技术方案：一种基于狭槽器件的多元待测物检测方法，该方法包括以下步骤：

a)在狭槽内表面多个检测带(T带)区域固定特异性结合物质，制备捕获探针；

b)以荧光物质标记与捕获探针相匹配的其它特异性结合物质，制备信号报告分子；

c)将样品、信号报告分子吸入狭槽，使样本中的待测物质与捕获探针、信号报告分 子发生结合反应，使待测物和信号报告分子富集在狭槽的检测带(T带)；

d)洗涤除去未结合的信号报告分子，直接检测狭槽内T带的荧光强度，实现待测物 的定量或定性测定。