[发明专利]瘦肉精快速检测试剂盒及制造方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种快速检测家畜体内瘦肉精含量的试剂盒以及该试剂盒的制造方法。

背景技术

瘦肉精，化学名称为盐酸克伦特罗(HCl-clenbuterol)，商品有克喘素、息喘宁、舒喘宁、平喘素、安喘素等，是选择性β2-肾上腺素受体激动剂。它是白色或类白色的结晶性粉末，无臭，味苦，具有调节动物神经兴奋及其体内营养素重分配的功能。其化学性质稳定，加热至172℃时才分解，一般方法不能将其破坏。肠道吸收快，作用时间持久，药理作用强。畜种作用范围广泛、药效强劲、选择性高、易吸收、固定难分解、溶化。

盐酸克伦特罗开始使用是作为治疗哮喘的兽药，它可引起交感神经兴奋，在治疗剂量下，能强而持久地松弛支气管平滑肌，从而治疗哮喘。后来在猪、牛、羊等肉畜饲料中添加应用，减缓或减少脂肪沉积，增加肌肉蛋白沉积，使营养重新分配，从而改善肉畜胴体品质(提高瘦肉率、减少脂肪率)。盐酸克伦特罗能激动脂肪组织的β-肾上腺素受体，使脂肪激酶活化，促进甘油三酯分解成游离脂肪酸和甘油，动物体内脂肪动用产热，基础代谢水平提高。

盐酸克伦特罗在家畜和人体内吸收好，而且与其它β-兴奋剂相比，它的生物利用度高，以至食用了含有盐酸克伦特罗的家畜肉出现中毒。Zimmer(1976)证实人内服20μg的14C-瘦肉精，峰浓度时，血浆中盐酸克伦特罗原形药占总的14C-瘦肉精的75％。盐酸克伦特罗内服生物利用度高的事实对估计消费者食用了含有盐酸克伦特罗的组织，从中获得的盐酸克伦特罗的量很重要。引起人中毒的动物组织含有盐酸克伦特罗原形药的量差异很大。Martinez-Navarro(1990)报道犊牛肝中盐酸克伦特罗原形药的残留量为161～291ppb，Pulce等(1991)报道犊牛肝中盐酸克伦特罗的残留量为375～500ppb，Salleras等(1995)报道犊牛肝中盐酸克伦特罗的残留量为19～5395ppb。此外，Maistro等(1995)报道犊牛肌肉中盐酸克伦特罗的残留量为500ppb。

瘦肉精的应用对动物有害，在饲用初期会在短期内出现如下症状：血压升高、血管扩张、心率加快、呼吸加剧、体温上升、心脏和肾脏负担加重等剧烈反应，并出现采食下降、行为动作失调、神经紧张不安甚至全身震颤等症状。而且动物长期饲用会使机体内部受体数目减少，失去对瘦肉精的敏感性，导致动物自身促肌肉生长效应逐渐丧失，只有连续使用才会保持已获得的效果。虽然定期停药可恢复机体对瘦肉精的敏感性，但它使已获得的效果迅速丢失，直接损伤肉畜的机体。

人食用了含有克喘素等瘦肉精残留的肉食，会出现类似于动物甚至比动物更严重的症状。它可引起血压升高、血管扩张、心跳加快、呼吸加剧、体温升高、肌肉颤抖，使患者产生头痛、胸闷、神经过敏、肌肉痛疼、心悸、恶心、呕吐等症状。更为严重的是它可诱发和加重心率失常病人的病情，引起心室早搏，四肢、脸、颈部骨骼肌震颤。另外还引起代谢紊乱，产生酮体，对糖尿病人可发生酸中毒或酮中毒。瘦肉精对人体危害的持续时间较长，虽然目前未有中毒患者死亡的报道，但给患者的精神、健康及正常生活工作造成了严重危害。

我国政府严令申明不得在家畜的饲料及其他添加物中使用瘦肉精，并且通过相关政策手段对相关领域进行行政干预和抽检。目前市场管理中，对猪肉和生猪的检验在该方面技术还没有完整和快速检测结果的手段。

发明内容

本发明的目的在于克服现有检测技术中存在的不足，提供一种操作简单、方便，不需要依靠专业仪器和专业人士就能定性检测家畜体内瘦肉精含量水平的试剂盒。

本发明的另一目的则是提供一种上述试剂盒的制备方法。

本发明是这样实现的：一种瘦肉精快速检测试剂盒，包括盒外壳和盒内测试板，其特征在于：所述测试板包括PVC板条、吸水纸、硝酸纤维素膜、玻璃纤维，PVC板条用来支撑反映体系，在PVC板条上设有用于提供层析系统的两条平行设置的吸水纸，两条吸水纸之间串联连接硝酸纤维素膜、玻璃纤维，吸水纸、硝酸纤维素膜、玻璃纤维相连成桥式结构，硝酸纤维素膜上吸附瘦肉精—BSA抗体、抗猪—IgG抗体反应物，玻璃纤维吸附瘦肉精—BSA抗体—燃料复合反应物。在检测试剂盒的检测单元中包含用于支撑整个检测系统的塑料外壳、支撑反应体系的PVC板条、用于提供层析系统的吸水纸、用于吸附反应物的硝酸纤维素膜和玻璃纤维、反应物(包括瘦肉精—BSA偶联物，抗猪IgG抗体、结合染料的瘦肉精—BSA抗体、等等)。在整个试剂盒内还包括用于防止潮湿的干燥剂。

瘦肉精快速检测试剂盒的制造方法包含如下步骤：

(一)反应物制备