[发明专利]抗人CD34抗体、其制备方法及用途

说明书

技术领域

本发明属于生物技术领域，更具体地，本发明公开了一种抗体、其制备方 法及用途。

背景技术

在某些恶性血液病及实体瘤的临床治疗上，造血干/祖细胞 (hematopoietic stem/progenitor cells，HSC)和移植已经成为目前公认的唯 一有效的治疗方法。但因移植物中含有大量T淋巴细胞致使移植后发生急性、重 度移植物抗宿主病(graft-versus-host disease GVHD)是影响异基因造血干细 胞移植能否获长期生存的主要原因之一。造血干/祖细胞移植面临的首要问题 是如何获得大量纯化的造血干细胞，以去除杂质细胞对移植的干扰，因此，清除 或富集移植物中特定的细胞是当前移植领域所关注的问题。由于HSCs没有明确 的形态学特征，主要表现为淋巴细胞样的单个核母细胞，所以只能以细胞表面 的一些蛋白来鉴定。CD34是一个分子量约110Kd的穿膜糖蛋白，是目前所能认识 的表达在人类HSC上最早期也是最广泛的抗原，是衡量HSC质与量的较好的标志， 随着基于CD34抗体的阳性选择技术的发展，CD34⁺造血干细胞无论是在实验性动 物还是在人身上都显示出重建造血的功能[Andrews RG，Bryant EM，Bartelmez SH，Muirhead DT，Knitter GH，Bensinger W，Strong DM，Bernstien ID(1992)CD34 marrow cells，devoid of T and B Lymphocytes，reconstitute stable lymphopoiesis and myelopoiesis in lethally irradiated baboons.Blood 80：1693][Shpall EJ，Jones RB，Franklin W，Bearman S，Stemmer S，Hami L，Petsche D，Taffs S，Myers S，Purdy M，Heimfeld S，Halligan J，Berenson RJ(1994)Transplantation of autologous CD34⁺ hematopoietic progenitor cells into breast cancer patient following high-dose chemotherapy.J Clin Oncol 12：28]，因此它们以其独特的生物学特性与功能正成为造血干细胞移植 最理想的靶细胞。

CD34单克隆抗体识别CD34抗原的不同表位，这些表位根据它们对神经氨酸 酶，木瓜蛋白酶和糖蛋白酶的敏感程度不同，可以分为三类：I类(对三种酶 敏感)；II类(对神经氨酸酶抵抗，对木瓜蛋白酶和糖蛋白酶敏感)；III类(对 三种酶抵抗)[Greaves，MF，Titley I，Colman SM et al.CD34 cluster workshop report.In：Schlossman S et al(eds).Leucocyte Typing V.Oxford University Press：Oxford，1995，pp840-846.]。在正常的造血干细胞上，这些表位的分布是 不同的，这可能与造血干细胞的分化，成熟和功能有关。因此，针对不同表位 的单克隆抗体就可以检测出不同数量的CD34⁺造血干细胞[Rita Steen，Geir E. Tjqnnfjord，Gustav Gaudernack，Lorentz Brinch，Torstein Egeland.Differences in the distribution pf CD34 epitopes on normal haemopoietic progenitor cells and leukaemic blast cells.British Journal of Haematology 1996，94：597-605.]。

近20年来随着免疫磁珠的问世，通过CD34单克隆抗体偶联磁性纳米微球制 备相应的免疫磁珠来分选骨髓造血干细胞已广泛应用于临床造血干细胞移植， 由于用其分选细胞具有操作简便、分离迅速完全、细胞纯度高等优点，已成为 某些恶性血液病、重症免疫缺陷和肿瘤放化疗所至的造血功能低下等疾病的首 选疗法。