[发明专利]一种从中药喜树提取液中分离喜树总生物碱的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种中药有效成分的提取分离方法，特别是涉及一种从中药喜树提取液中提取分离喜树总生物碱的方法，属中药领域。

背景技术

生物碱是自然界中广泛存在的一大类碱性含氮化合物，是许多中草药的有效成分，是自然界中存在的一类重要物质。喜树为我国特有植物，来源为珙桐科喜树属植物喜树Camptotheca acuminata Decne.，由于根、果、树皮、树枝、叶等可提取多种生物碱，可治疗多种癌症，因此具有很高的开发价值。喜树性凉、味苦涩，具有抗癌、清热、杀虫等功效。研究表明，喜树总生物碱是其主要有效部位，包括喜树碱(Camptothecine)、10-羟基喜树碱(10-Hydroxy camptothecine)、甲氧基喜树碱(Methoxy camptothecine)、喜树次碱(venoterpine)等。临床制剂主要用于治疗胃癌、结肠癌、直肠癌、膀胱癌、慢性粒细胞性白血病、急性淋巴细胞性白血病等。因此，喜树总生物碱有效部位制剂临床需求量很大。

现阶段，中药生物碱的提取工艺已较成熟，根据生物碱的理化特性，采用适宜的溶剂如水、酸水、酸醇及碱醇等，利用浸渍、渗漉、煎煮、回流、超声、酶解等技术将生物碱类成分提取出来，提取率能达到90％以上。但由于生物碱在中药中的相对含量较低(多数含量为0.01％-1％)，提取时势必引入大量的其他药物成分和杂质类成分，要保证最后制剂的安全有效，必须对其进行精制纯化，制备成有效部位甚至有效成分来应用，因此生物碱有效部位的精制纯化技术就显得十分重要。但由于其他多种成分的并存以及淀粉、树胶、果胶、粘液质、色素等杂质的干扰，生物碱有效部位的精制技术一直是中药现代化的“瓶颈”，严重影响了现代中药制剂对三效(高效、速效、长效)、三小(剂量小、毒性小、副作用小)、五方便(生产、运输、携带、贮存、应用方便)的要求。现今，生物碱有效部位的精制技术主要是有机溶剂萃取法、大孔树脂法以及离子树脂法等。

有机溶剂萃取法是利用亲脂性生物碱溶于亲脂性有机溶剂，而其盐溶于水的性质，使生物碱酸碱转化，利用有机溶剂(常用的如苯、三氯甲烷、乙醚等)萃取，去除大量的杂质。有机溶剂萃取法在喜树总生物碱的精制纯化中应用较为广泛，但该法存在很多的问题：将生物碱提取液碱化后大量中性及非极性色素等杂质易被带入，因此分离效率和纯度较低，且使用大量有机溶剂(一般萃取5次)，操作不便(萃取罐效率不高，且易乳化)，安全性不佳(有机溶剂毒性大，且易燃易爆)，为实验室工艺，不适合工业大生产。

大孔吸附树脂分离技术，选择性吸附中药提取液中有效成分，去除杂质。与传统的除杂方法和工艺相比，可缩小服药剂量，提高了制剂的质量，该法对水溶性较好的黄酮、皂苷等有良好的分离精制效果，如目前常用的银杏类制剂及人参皂苷的制备等。但对于生物碱的精制来讲，本法最大的不足在于：首先是吸附困难，上样药液必须是稀溶液，碱度要适宜，碱度低则生物碱仍为离子化状态，树脂的吸附率低，碱度高，生物碱为游离型，大分子生物碱水溶性差而析出，仍然无法上柱，适用的生物碱范围很小，品种太少；其次，大孔吸附树脂的非极性静电吸附原理对生物碱有效成份和脂溶性杂质的分离选择性太差，且在溶剂洗脱过程中由于没有特异性的洗脱溶剂，生物碱和大量脂溶性杂质往往一起被洗涤下来，最后精制得到的总生物碱纯度不高。

还有新兴的离子交换树脂分离技术，是通过离子交换反应达到分离和纯化的目的。目前在中药领域所普遍采用的技术是，将含有生物碱的溶液过柱后，以氨液或NaOH溶液洗脱，收集洗脱液后再以有机溶剂萃取生物碱；或者将上过样品的树脂以碱液浸泡，然后再用有机溶剂回流提取生物碱。但该方法步骤繁琐，有机溶剂萃取、将树脂柱进行有机溶剂回流提取等步骤在工业上很难实现，且以碱液洗脱的效率很低，仅停留于实验室制备小样品的水平，也无法实现大生产。

发明内容

本发明的目的是提供一种安全、低成本、高效率的提取分离喜树总生物碱的方法。

该发明目的是通过如下工艺实现的：取喜树提取液，调整pH值1至7，滤过，取滤液加于阳离子交换树脂柱上，先以水洗脱除杂，再用0.5％～15％酸液洗脱，收集洗脱液，加碱中和，经脱盐处理，即得喜树总生物碱。