[发明专利]一种从中药蚕沙提取液中分离蚕沙总生物碱的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种中药有效成分的提取分离方法，特别是涉及一种从中药蚕沙提取液中提取分离蚕沙总生物碱的方法，属中药领域。

背景技术

生物碱是自然界中广泛存在的一大类碱性含氮化合物，是许多中草药的有效成分，是自然界中存在的一类重要物质。蚕沙为蚕蛾科昆虫家蚕蛾(Bombyx mon L.)幼虫的干燥粪便，又称晚蚕沙、蚕屎、马鸣肝、晚蚕矢、二蚕沙等。研究表明，蚕沙中总生物碱是其主要有效部位，其中的代表成分为脱氧野尻霉素(1-Deoxynojirimycin Hydrochloride，DNJ)，这种生物碱是一种天然糖的结构类似物，具有很高的a-葡萄糖普酶的抑制活性，可用于治疗糖尿病、肥胖症、病毒感染等疾病。此外，蚕沙临床上还具有祛风除湿、活血定痛之功效，可用于风湿痹痛、风疹痉痒、头风头痛、关节不遂、急剧吐泻转筋、腰脚冷涌、烂弦风眼等症的治疗。因此，蚕沙总生物碱有效部位制剂临床需求量很大。

现阶段，中药生物碱的提取工艺已较成熟，根据生物碱的理化特性，采用适宜的溶剂如水、酸水、酸醇及碱醇等，利用浸渍、渗漉、煎煮、回流、超声、酶解等技术将生物碱类成分提取出来，提取率能达到90％以上。但由于生物碱在中药中的相对含量较低(多数含量为0.01％-1％)，提取时势必引入大量的其他药物成分和杂质类成分，要保证最后制剂的安全有效，必须对其进行精制纯化，制备成有效部位甚至有效成分来应用，因此生物碱有效部位的精制纯化技术就显得十分重要。但由于其他多种成分的并存以及淀粉、树胶、果胶、粘液质、色素等杂质的干扰，生物碱有效部位的精制技术一直是中药现代化的“瓶颈”，严重影响了现代中药制剂对三效(高效、速效、长效)、三小(剂量小、毒性小、副作用小)、五方便(生产、运输、携带、贮存、应用方便)的要求。

虽然在教科书及各种文献中多有提取分离中药总生物碱的方法，但这些方法仅停留于实验室的研究水平，多数是将含有生物碱的溶液过柱后，以氨液或NaOH溶液洗脱，收集洗脱液后再以有机溶剂萃取生物碱；或者将上过样品的树脂以碱液浸泡，然后再用有机溶剂回流提取生物碱。但这些方法具有步骤繁琐，有机溶剂用量大、大设备无法实现和生物碱转移率低等缺点，因而一直处于实验室研究水平，不能在大生产中应用。在中国专利申请200510122258.X中提出了一种最新的从中药蚕沙中提取分离总生物碱的技术是用离子交换树脂法，基本过程为：将醇沉浓缩后的上清液经交联聚苯乙烯系的碱性型树脂柱，用去离子水冲洗，收集不吸附部分，再经交联聚苯乙烯系的强酸型树脂柱进行纯化，用去离子水洗去不吸附的杂质，再用0.2～1N氨水洗脱，洗脱液经减压浓缩除去氨水，收集生物碱阳性部分洗脱液，经脱色、浓缩、干燥制得蚕沙总生物碱。这种方法避免了大量有机溶剂的使用，具有一定的进步性，但仍存在严重缺陷：试验中可以发现该方法虽可以提高生物碱的纯度，但氨洗使生物碱呈游离型，水溶性下降，需要大量氨水洗脱，且洗脱不完全，总生物碱的转移率仍然不高；同时使用二种树脂柱，增加了工艺步骤，提高了成本，不适于工业生产。故为了适应市场及生产，需要一种安全、低成本、收率高的提取分离方法。

发明内容

本发明的目的是提供一种安全、低成本、高效率的提取分离蚕沙总生物碱的方法。

该发明目的是通过如下工艺实现的：取蚕沙提取液，调整pH值1至7，滤过，取滤液加于阳离子交换树脂柱上，先以水洗脱除杂，再用0.5％～15％酸液洗脱，收集洗脱液，加碱中和，经脱盐处理，即得蚕沙总生物碱。

在上述工艺过程中，将含有总生物碱的提取液调至合适的酸度后，生物碱电离成为阳离子，非碱性物质不被电离，提取液过阳离子交换树脂柱后，电离的生物碱有机离子与树脂柱上的氢离子交换而被牢固地吸附于树脂柱上。这里提取液的pH值不宜过高或过低，如果过高，提取液呈中性或碱性，生物碱不能电离，也就不能完成树脂上的交换过程；如果过低，提取液中的氢离子浓度太高，阻碍了树脂柱上的氢离子解离，同样不能很好地完成树脂交换过程，因而实验中发现调整提取液的pH值为1至7是比较合适的。以水洗脱时，使用的是去离子水，以确保不引入新的离子干扰，洗脱时那些没有被树脂吸附的非碱性物质就很容易被水洗脱下来，从而与被吸附在树脂柱上生物碱有机离子分离了。此后再加较高浓度的酸液进行洗脱，由于此时酸液中的氢离子浓度很高，就会竞争性地与树脂相结合，从而将吸附在树脂柱上的生物碱有机离子交换下来，溶解在酸洗脱液中，流出树脂柱，完成生物碱的富集过程。之后，在洗脱液中加入碱中和掉多余的酸，再经常规脱盐处理，即可得到纯度较高的蚕沙总生物碱了。