[发明专利]放射性核素99锝m标记嗜酸乳杆菌的制备方法

权利要求书

1.一种采用放射性核素⁹⁹锝^m标记嗜酸乳杆菌的放射性核素⁹⁹锝^m标记嗜酸乳杆菌的制备方法，其特征是在超净台内，用MRS培养基，在37℃厌氧条件下，将真空冷冻干燥嗜酸乳杆菌种复苏，经两次传代后，再用LbS选择性培养基37℃厌氧培养；

收集嗜酸乳杆菌；取盐水，注入PYP瓶内，摇匀，将瓶内液体取出，再注入第二瓶PYP中，根据需要可一直注入到第五瓶，甚至更多瓶中；

将最终的液体取出，注入到盛细菌的瓶内，摇匀；

将盛细菌瓶放置于培养箱或温箱中孵育；

将瓶取出，用盐水冲洗，离心机离心；再冲洗，再离心多次；

弃上清液，加入新鲜至多天内淋洗的⁹⁹Tc^mO₄液1mci或更大的放射性活度到盛沉淀的乳杆菌瓶内；放置于培养箱或温箱中孵育；

重复上述冲洗、离心多次；弃上清液，沉淀部分用放射性活度计测量后，即成。

2.根据权利要求1所述的放射性核素⁹⁹锝_m标记嗜酸乳杆菌的制备方法，其特征是在超净台内，用MRS培养基，在37℃厌氧条件下，将真空冷冻干燥嗜酸乳杆菌种复苏，经两次传代后，再用LbS选择性培养基37℃厌氧培养多天；

收集嗜酸乳杆菌，取pH0.1～6.0盐水0.5～5.0ml，注入PYP瓶内，摇匀，将瓶内液体取出，再注入第二瓶PYP中，根据需要可一直注入到第五瓶，甚至更多瓶中；

将最终的液体取出，注入到盛细菌的瓶内，摇匀；

将盛细菌瓶放置于1℃～65℃的培养箱或温箱中孵育1min～60min；

将瓶取出，用pH0.1～6.0盐水0.5～5.0ml冲洗，离心机以100～4500转/min离心0.1min～20min；再冲洗，再离心多次；

弃上清液，加入新鲜至多天内淋洗的⁹⁹Tc^mO₄液0.1～1000mci或更大的放射性活度到盛沉淀的乳杆菌瓶内，总体积1～10ml或更大；放置于1C°65C°的培养箱或温箱中孵育1min～60min；

重复上述冲洗、离心多次；弃上清液，沉淀部分用放射性活度计测量后，即成。

3.根据权利要求1或2所述的放射性核素⁹⁹锝^m标记嗜酸乳杆菌的制备方法，其特征是所述收集嗜酸乳杆菌的方法是银饵采集，从培养基中收集细菌数为10¹～10²⁰个。

4.根据权利要求1或2所述的放射性核素⁹⁹锝^m标记嗜酸乳杆菌的制备方法，其特征是所述真空冷冻干燥嗜酸乳杆菌种，其菌种编号为1.1845，保藏编号为ADGA-A，由中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)提供。

5.根据权利要求1或2所述的放射性核素⁹⁹锝^m标记嗜酸乳杆菌的制备方法，其特征是所采用的MRS培养基按CGMCC提供的具有以下组成：在总重量为100中，蛋白胨占0.93％，牛肉提取物占0.93％，酵母提取物占0.465％，葡萄糖占0.465％，乙酸钠占0.465％，柠檬酸二胺占0.186％，Tween 80占0.093％，K2HPO4占0.186％，MgSO4·7H2O占0.186％，MnSO4·H2O占0.00465％，CaCO3占1.86％，琼脂占1.395％，蒸馏水占92.57％，pH6.8。

6.根据权利要求1或2所述的放射性核素⁹⁹锝^m标记嗜酸乳杆菌的制备方法，其特征是所述乳杆菌选择性培养基(LbS)按下述配置方法配置：蛋白胨0.93％，肉膏0.93％，酵母浸膏0.463％，葡萄糖1.86％，吐温800.093％，K₂HPO₄0.186％，醋酸钠0.463％，枸橼酸三氨0.186％，MgSO₄·7H₂O 0.0186％，MnSO₄·H₂O 0.00463％，琼脂2.31％，精制水92.57％；加热溶解后，调pH6.0～6.5，115℃20分钟灭菌。

7.根据权利要求1或2所述的放射性核素⁹⁹锝^m标记嗜酸乳杆菌的制备方法，其特征是在PYP瓶内有Na4P2O7 2H2O 10mg和SnCl2 2H2O 1.0mg。