[发明专利]病原微生物检测用引物和使用所述引物的多重扩增有效
申请号: | 200710099757.0 | 申请日: | 2007-05-30 |
公开(公告)号: | CN101113475A | 公开(公告)日: | 2008-01-30 |
发明(设计)人: | 张建中;曾浔;尤元海;姜海;肖迪;闫笑梅 | 申请(专利权)人: | 中国疾病预防控制中心传染病预防控制所 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68;C12Q1/04;C12N15/11;C12P19/34 |
代理公司: | 北京三友知识产权代理有限公司 | 代理人: | 赵晓梅 |
地址: | 1022*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 病原微生物 检测 引物 使用 多重 扩增 | ||
1.一套病原微生物检测用引物,其包括以下序列:SEQ ID Nos.9和10、SEQ ID Nos.3和4、SEQ ID Nos.5和6、SEQ ID Nos.7和8、SEQ ID Nos.17和18、SEQ ID Nos.23和24、SEQ ID Nos.25和26、SEQ ID Nos.27和28、SEQ ID Nos.11和12、SEQ ID Nos.43和44、SEQ ID Nos.31和32、SEQ ID Nos.51和52、SEQ ID Nos.59和60、SEQ ID Nos.57和58、SEQ ID Nos.61和62、和SEQ ID Nos.67和68。
2.如权利要求1所述的病原微生物检测用引物,其还包括以下序列:SEQ ID Nos.1和2、SEQ ID Nos.37和38、SEQ ID Nos.39和40、SEQ ID Nos.41和42、SEQ ID Nos.13和14、SEQ ID Nos.19和20、SEQ ID Nos.21和22、SEQ ID Nos.29和30、SEQ ID Nos.55和56、SEQ ID Nos.33和34、SEQ ID Nos.47和48、和SEQ ID Nos.65和66。
3.如权利要求1或2所述的病原微生物检测用引物,其还包括以下序列:SEQ ID Nos.15和16、SEQ ID Nos.35和36、SEQ ID Nos.53和54、SEQ ID Nos.45和46、SEQ ID Nos.49和50、和SEQ ID Nos.63和64。
4.一种多重扩增检测方法,该方法包括利用权利要求1~3任一项所述的引物进行扩增,或利用权利要求1、2和/或3中任意3种或3种以上引物进行混合扩增;优选所述扩增选自:聚合酶链式反应、连接酶链式反应、链置换扩增、核酸单碱基取代、转录介导扩增。
5.如权利要求4所述的方法,该方法进一步包括在所述扩增之后进行定性或定量分析;优选所述的定性分析包括用凝胶电泳显示所述扩增的产物或用荧光扫描显示杂交后的液相扩增产物。
6.如权利要求1~3任一项所述的病原微生物检测用引物在制备检测剂中的应用。
7.如权利要求6所述的应用,其中所述的检测剂用于检测霍乱弧菌、致病性大肠杆菌、空肠弯曲菌、小肠结肠炎耶尔森氏菌、副溶血弧菌、沙门菌、志贺菌和李斯特菌,以及包含以上任何一种或一种以上病原体的鉴别诊断用样品。
8.如权利要求7所述的应用,所述的检测剂用于对排泄物、肠积液、呕吐物、土壤、水样、食品或化妆品进行检测。
9.一种病原微生物检测用试剂盒,该试剂盒包含权利要求1~3任一项所述的引物。
10.如权利要求9所述的检测用试剂盒,该试剂盒还包括以下标记或未标记的探针:SEQ ID No.73、SEQ ID No.70、SEQ ID No.71、SEQ ID No.72、SEQ ID No.77、SEQ IDNo.80、SEQ ID No.81、SEQ ID No.82、SEQ ID No.74、SEQ ID No.90、SEQ ID No.84、SEQ ID No.94、SEQ ID No.98、SEQ ID No.97、SEQ ID No.99、SEQ ID No.102;优选还进一步包括以下探针:SEQ ID No.69、SEQ ID No.87、SEQ ID No.88、SEQ ID No.89、SEQ ID No.75、SEQ ID No.78、SEQ ID No.79、SEQ ID No.83、SEQ ID No.96、SEQ IDNo.85、SEQ ID No.92、SEQ ID No.101;更优选还进一步包括以下探针:SEQ ID No.76、SEQ ID No.86、SEQ ID No.95、SEQ ID No.91、SEQ ID No.93、SEQ ID No.100。
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