[发明专利]全碱性氨基酸寡肽及其铜络合物、其合成方法、自组装及应用

说明书

技术领域

本发明涉及寡肽及其铜络合物，尤其涉及全碱性氨基酸寡肽及其铜络合物、其合成方法、自组装为纳米颗粒，本发明还涉及所述的全碱性氨基酸寡肽及其铜络合物作为抗血栓药物的应用，属于生物医药领域。

背景技术

血管栓塞性疾病对心脑血管疾病的高死亡率负最重要的责任。血栓形成是血管栓塞性疾病发病的最重要的病因。目前临床使用的治疗急性血栓栓塞性疾病的链激酶、尿激酶和重组组织型纤溶酶原激活剂等药物普遍存在全身出血倾向和免疫原性反应，寻找安全有效的溶血栓药物是新药研究的热点之一。

在天然氨基酸中，L-Arg和L-Lys是碱性氨基酸。已知这两种碱性氨基酸有一些重要的生物活性。例如，在NO合成酶的作用下，L-Arg的胍基被氧化释放NO。NO具有舒血管活性和抗血小板聚集活性，赖氨酸抑制细胞黏附。

发明内容

本发明目的之一提供一类全碱性氨基酸寡肽及其铜络合物。

本发明目的之二是提供一种制备上述全碱性氨基酸寡肽及其铜络合物的方法。

本发明目的之一是通过以下技术方案来实现的：

全碱性氨基酸寡肽(通式I化合物)：

H-(AA)m-OH(通式I)，其中AA选自L-Arg或L-Lys残基中的一种；m为2-5的任意整数。

全碱性氨基酸寡肽与铜的络合物(通式II化合物)：

Cu(II)[H-(AA)m-OH]n(通式II)，其中AA选自L-Arg或L-Lys残基中的一种；m为2-5的任意整数，n为1或2。

本发明人认识到，重复结构单元获得的结构会导致活性增强，例如寡肽重复序列的生物活性往往强于母体肽，寡肽与过渡金属(如Cu)的络合物的生物活性往往强于肽配体。基于上述的认识，本发明人将L-Arg或L-Lys自身偶联成为全L-Arg或全L-Lys寡肽(本发明统称全碱性氨基酸寡肽)，所获得的全碱性氨基酸寡肽更具有较好的舒血管活性和抗血栓功效。本发明将全L-Arg或全L-Lys寡肽与Cu(II)络合，所获得的全精氨酸寡肽铜络合物或全赖氨酸寡肽铜络合物更具有较好的舒血管活性和抗血栓功效。

本发明目的之二是通过以下技术方案来实现的：

将L-Arg或L-Lys按照常规方法自身偶联成2-5个重复单元的全L-Arg或全L-Lys寡肽；在按照常规方法与铜(II)络合，得到全精氨酸寡肽铜络合物或全赖氨酸寡肽铜络合物。

本发明在大鼠颈动静脉旁路插管模型上评价了通式I化合物和通式II化合物的抗血栓活性，使用扫描电镜考察了它们自组装为纳米颗粒的现象。试验结果表明，本发明通式I化合物或通式II化合物均具有优秀的抗血栓活性。

附图说明

图1全精氨酸寡肽及铜(II)配合物的合成路线；i)二环己基羰二亚胺(DCC)、羟基苯并三氮唑(HOBt)、N-甲基吗啉(NMM)；ii)氯化氢/乙酸乙酯溶液(4N)；iii)三氟乙酸/三氟甲磺酸(4/1)；iv)pH8-9。

图2全赖氨酸寡肽及铜(II)配合物的合成路线；i)DCC、HOBt、NMM；ii)氯化氢/乙酸乙酯溶液(4N)；iii)H₂、Pd/C；iv)pH8-9。

图3H-Lys-Lys-OH(5)的扫描电镜图。

图4Cu(II)[H-Lys-Lys-OH](5-Cu)的扫描电镜图。

具体实施方式

下面通过实施例对本发明作进一步说明。应当指出，这些实施例仅仅是本发明的例证，不应理解为对本发明的限制。

实施例1制备H-Arg-Arg-OH(该化合物的编号为1)

1)制备Boc-Arg(Tos)-Arg(Tos)-OBzl

将654mg(1.53mmol)Boc-Arg(Tos)-OH溶于6ml无水THF，冰浴下往得到的溶液中加入206mg(1.5mmol)N-羟基苯并三氮唑(HOBt)，并使完全溶解。10分钟后滴加入371mg(1.8mmol)二环己基羰二亚胺(DCC)无水THF溶液。得到反应液(I)，待用。冰浴下将884mg(1.5mmol)Tos·H-Arg(Tos)-OBzl溶于9ml无水THF中，然后用N-甲基吗啉(NMM)，调pH7-8。搅拌35分钟，得到反应液(II)，待用。