[发明专利]重组抗人IgE单克隆抗体及其制备方法和用途

说明书

技术领域

本发明涉及抗体药物技术领域，具体的说，涉及一种新的重组抗人IgE单克隆抗体及该单克隆抗体的制备方法和用途。

背景技术

超敏反应是指机体受某种抗原物质刺激后产生的一种异常或病理性免疫反应，常表现为免疫反应性增高，多在机体再次接触相同抗原时发生。超敏反应与免疫应答本质上都是机体对某些抗原物质的特异性免疫应答，但前者主要表现为组织损伤和(或)生理功能紊乱，后者主要表现为生理性防御效应。目前将超敏反应、变态反应(allergy)和过敏反应(anaphylaxis)这几个含义近似的词互用，但多倾向于用超敏反应。

超敏反应的发生主要涉及两个方面的因素：一是抗原物质的刺激，二是机体的反应性。抗原物质的刺激是诱导机体发生超敏反应的先决条件，诱发超敏反应的抗原称为变应原(allergen)或过敏原(anaphylactogen)。它们可以是完全抗原，如异种血清、异体组织细胞、各种微生物、寄生虫及其代谢产物、植物花粉和动物皮毛等；也可以是半抗原，如青霉素、磺胺等药物，以及染料、生漆和多糖等低分子物质。这些变应原可通过不同的途径进入机体。此外，机体受微生物感染、电离辐射、烧伤等生物、理化因素影响而发生结构或组成改变的自身组织抗原，以及由于这些因素引起组织损伤而释放的自身隐蔽抗原，也可以成为变应原。抗原的刺激是发生超敏反应的重要因素，但针对同一种抗原的不同个体可表现出极不相同的结果，如有反应或无反应、反应较轻或反应严重、甚至达到致死程度。因此，超敏反应的发生除取决于变应原质和量及进入机体的途径外，尚与个体的遗传因素及机体的免疫反应性等因素密切相关。

超敏反应的分类方法很多，但目前大多采用Gell和Coombs(1963)的分类，即根据超敏反应发生的机制和临床特点分为I～IV四个型：①速发型超敏反应(I型)；②细胞毒型超敏反应(II型)；③免疫复合物型超敏反应(III型)；④迟发型超敏反应(IV型)。I、II、III型由抗体介导，可经血清被动转移给其它动物；IV型由T细胞介导，可经细胞转移。超敏反应所致免疫损伤的发生机制十分复杂，临床实践所见往往为混合型，仅以某一型损伤为主。

IgE是介导变应性应答(如广泛遭受的哮喘、食物过敏、I型超敏反应和家族性(familiar)窦炎)的免疫球蛋白家族中的一个成员。IgE由B细胞或B淋巴细胞分泌并表达在细胞表面。IgE通过其针对低亲和力IgE受体(称为FcsRII)的Fc区域结合B细胞(以及单核细胞、嗜酸性粒细胞和血小板)。在哺乳动物接触变应原时，携带对抗原特异性的、表面结合的IgE抗体的B细胞被“激活”并发育成分泌IgE的浆细胞。然后，产生的变应原特异性的IgE通过血液循环，通过高亲和力受体(也称为FCsRI)结合到组织中肥大细胞以及血液中的嗜碱性粒细胞的表面上。从而，使肥大细胞和嗜碱性粒细胞对变应原致敏。随后与变应原的接触引起嗜碱性粒细胞和肥大细胞的FcsRI交联，从而导致释放出引起临床超敏反应和过敏症状的组胺、白细胞三烯和血小板激活因子、嗜酸性粒细胞和嗜中性粒细胞趋化因子和细胞因子IL-3，IL-4，IL-5和GM-CSF a

最近，对I型超敏反应或过敏性超敏反应已经获得一种治疗方案，它试图阻断IgE与嗜碱性粒细胞以及肥大细胞上发现的高亲和力受体(FcsRI)结合，从而防止组胺和其它过敏性因子的释放而导致产生病理状态。

Xolair(Omalizumab)为基因重组抗人IgE单克隆抗体。该抗体分子量约为149kDa。Xolair抑制IgE与肥大细胞与嗜碱性粒细胞表面高亲和力IgE受体(FcεRI)结合。IgE与FcεRI阳性细胞结合的减少限制了介导过敏反应的物质的释放。Xolair治疗遗传性过敏症患者还可使嗜碱性粒细胞表面的FcεRI减少。Xolair上市后用于治疗哮喘病，并取得了一定的治疗效果，但是还有许多哮喘病人对Xolair的治疗表现为无反应性，因此，临床上急需一种特异性更强、亲和力更高的替代产品。

发明内容

本发明的需要解决的技术问题之一是提供一种重组抗人IgE单克隆抗体，以克服现有技术的不足。

本发明需要解决的第二个技术问题是提供一种编码上述重组抗人IgE单克隆抗体的DNA分子。

本发明需要解决的第三个技术问题是提供一种表达载体。

本发明需要解决的第四个技术问题是提供一种真核宿主细胞。

本发明需要解决的第五个技术问题是提供一种上述单克隆抗体的用途。

本发明需要解决的第六个技术问题是提供一种该重组抗人IgE单克隆抗体的制备方法。