[发明专利]与鼻咽癌的发生和淋巴结转移相关的MDM2基因多态性及其检测方法

说明书

技术领域

本发明涉及鼻咽癌人群预防中的个体易感性及其遗传学检测方法。具体地，本发明涉及与鼻咽癌易感性相关的易感基因MDM2的SNP309多态性位点的基因型及其检测方法。本发明进一步涉及上述易感基因型的检测试剂盒，以及该试剂盒的应用。另外，本发明还涉及上述检测方法和易感基因在鼻咽癌的预防和控制以及相关遗传咨询中的应用。

背景技术

鼻咽癌(NPC)是一种上皮源性的恶性肿瘤，其发病具有明显的地域和种族差异。在中国南方和东南亚国家或地区(如新加坡、中国台湾和中国香港等)相对高发，其发病率几乎是高加索人群的100倍。鼻咽癌的易感性在种族和地区分布上的明显差异是多因素或多基因协同交互作用的结果，与EB病毒(Epstein-Barr)感染、环境理化因素和遗传因素有关。鉴定NPC的易感基因有助于预测鼻咽癌发生的个体风险和群体风险、有助于阐明该疾病的致病机制。

以往的连锁分析提示多个染色体区域可能包含NPC的易感基因。一项基于中国南方人群的受累同胞对研究将易感位点定位于染色体的6p22区域，提示了HLA分子在NPC发病中的重要作用。最近，两项分别基于中国广东地区的20个家系和中国湖南地区的18个家系的全基因组连锁分析显示，在4p15.1-q12和3p21.31-21.2区域也分别存在NPC的易感位点。多个基于群体的遗传流行病学研究也揭示了一些与鼻咽癌易感性相关的位点，包括热休克蛋白70-2(heat shock protein 70-2，HSP70-2)，周期素D1(cyclin D1，CCND1)，DNA修复酶HOGG1和XRCC1，以及谷胱甘肽S-转移酶M1(glutathione S-transferase M1，GSTM1)基因等。近来，我们还发现NPC与PLUNC基因(palate，lung and nasal epithelial clone gene)启动子区域的多态性相关。然而，除上述的多个基因外，可能尚有多个未被鉴定的基因修饰鼻咽癌的易感性。

众所周知，P53通路由于可导致细胞周期阻滞或凋亡从而在预防肿瘤方面发挥重要作用。已知P53的活性可由于p53基因中的突变而失活。然而，在缺乏p53突变的肿瘤中P53的功能尚可通过其它机制而失活或减弱，如鼠双微粒体2的人同源基因(Mdm2，transformed 3T3cell double minute 2，p53binding protein[mouse]，MDM2)蛋白产物的过表达。MDM2可通过至少三种不同的途径发挥负调控P53通路活性的作用。首先，MDM2通过结合P53的转录激活结构域，可阻止p53的转录活性。其次，MDM2作为泛素连接酶促进P53蛋白的降解。第三，由于MDM2具有核输出信号，结合P53之后，MDM2能促进P53的输出。此外，MDM2还可能具有P53非依赖性的功能，即通过与在细胞周期调控中起重要作用的其它蛋白(包括pRb、E2F/DP1和19ARF)相互作用而发挥相应的功能，虽然其中有些功能尚未得到明确的阐释。已有研究显示，MDM2过表达的转基因小鼠易于自发性形成肿瘤，且这些小鼠显示出由于MDM2引起的P53依赖性及P53非依赖性的致肿瘤性。在人类中，MDM2的扩增和/或过表达已经在超过40种不同类型的恶性肿瘤中得到详尽的描述，其过表达与更差的临床转归，增加的转移潜能，以及对治疗的反应性降低有关。在NPC的研究中表明，MDM2在EBV感染的细胞中以及31-56％的NPC肿瘤组织中过表达；并且MDM2 mRNA的过表达与NPC颈淋巴结转移显著相关。基于上述体内、外实验中MDM2在NPC致病机制中的潜在作用，我们假设MDM2可能是一个极佳的NPC的候选易感基因，MDM2的遗传多态性有可能导致NPC易感性的基因型依赖性的差异。