[发明专利]筛选在疟原虫中抑制GPI生物合成的化合物的方法无效
申请号: | 200710104287.2 | 申请日: | 2003-11-21 |
公开(公告)号: | CN101092628A | 公开(公告)日: | 2007-12-26 |
发明(设计)人: | 畑桂;小川薰;塚田格;中本和孝;相根康司;田中圭悟;塚原克平;堀井俊宏 | 申请(专利权)人: | 卫材R&D管理有限公司 |
主分类号: | C12N15/30 | 分类号: | C12N15/30;C07K14/445;C12N1/15;C12N1/19;G01N33/569 |
代理公司: | 北京市柳沈律师事务所 | 代理人: | 闵丹;巫肖南 |
地址: | 日本*** | 国省代码: | 日本;JP |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 筛选 疟原虫 抑制 gpi 生物 合成 化合物 方法 | ||
1、由核苷酸序列SEQ ID NO:5组成的DNA。
2、载体,其中插入权利要求1的DNA。
3、转化体,保留可表达状态的权利要求1所述DNA或者权利要求2所述载体。
4、权利要求3所述的转化体,其为GPI合酶基因-缺陷型真菌。
5、权利要求3所述的转化体,其为GPI合酶基因-缺陷型酵母。
6、一种制备由权利要求1所述DNA编码的蛋白的方法,该方法包括培养权利要求3-5中的任一转化体,并从该转化体或其培养上清液收集表达的蛋白的步骤。
7、一种筛选具有抗疟活性的化合物的方法,该方法包括以下步骤:
(1)将试样与表达权利要求1所述DNA的GPI合酶基因-缺陷型酵母接触;
(2)分析该酵母的生长,和
(3)选出抑制该酵母生长的被试化合物。
8、一种筛选具有抗疟活性的化合物的方法,该方法包括以下步骤:
(1)将试样与表达权利要求1所述DNA的GPI合酶基因-缺陷型酵母接触,
(2)检测GPI-锚定蛋白转运到酵母细胞壁的量,和
(3)选出使步骤(2)中所检测的GPI-锚定蛋白转运到酵母细胞壁的量减少的试样。
9、一种筛选具有抗疟活性的化合物的方法,该方法包括以下步骤:
(1)将权利要求1所述DNA导入GPI合酶基因-缺陷型酵母,并使该DNA编码的蛋白表达,
(2)获得步骤(1)中表达的蛋白,
(3)使所得蛋白与试样和具有与该蛋白结合的活性的标记化合物接触,
(4)检测与该蛋白结合的标记化合物,和
(5)选出减少与该蛋白结合的标记化合物的量的试样。
10、一种筛选具有抗疟活性的化合物的方法,该方法包括以下步骤:
(1)将(i)权利要求1的DNA,或者(ii)插入了权利要求1的DNA的载体,导入GWT1-缺陷型酵母,且表达由该DNA编码的蛋白
(2)获得步骤(1)中表达的蛋白,
(3)加入UDP-GlcNAc或酰基辅酶A,
(4)使所得蛋白与试样接触,
(5)检测GlcN-(酰基)PI,和
(6)选出减少GlcN-(酰基)PI水平的被试化合物。
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