[发明专利]哺乳动物促孕液

说明书

技术领域

本发明属于哺乳动物繁殖技术领域，是可以改善冷冻保存精液的受精能力的哺乳动物促孕液。

背景技术

受精是一个复杂的生物学过程，精子必须具备良好的运动能力，同时需经历获能和顶体反应才能实现受精。随着精液冷冻保存技术的进步，在养牛生产实践和实际研究应用时，冷冻保存精液使用普遍，但精液经冷冻一解冻过程后，其精液活力远不及新鲜精液，受胎率往往低于自然交配时的受胎率。

专利申请号：97106855.0公开了一种“混合牛、山羊精子的保存与使用”，其技术内容为：配制稀释液→磁化稀释液→采集稀释牛、山羊精子→混合牛、山羊精子→磁化保存→人工授精。稀释液的配方为：1000毫升基础液中含蔗糖40克、乳糖38.1克、葡萄糖19.1克、柠檬酸钠9.5克；按基础液79.5％、卵黄16％、甘油4.5％的比例混合。该发明可以提高良种公牛和名贵山羊精子的利用率，提高精子冷冻后的复苏率和活力。但是效果还不够理想。

目前，在实验室使用的一种受精液为BO液，其成分比较复杂由11种成分组成。BO液能使获能精子与牛成熟卵母细胞进行体外受精。但是，效果不够显著，而且成分复杂，不易获得，成本高，很难在基层牛场大范围推广，仅适于实验室使用。

发明内容

本发明的目的在于提供一种哺乳动物促孕液，可以提高精液活力，加速精子的获能和受精，减少人工授精的精液使用量，提高受胎率，其成分简单，容易获得，成本低，易于推广。

本发明的目的是：一种哺乳动物促孕液，它是由下列组分制成的：(用量为重量份)母液90-110、肝素0.002-0.005、咖啡因5-10、牛血清白蛋白0.3-0.5。

制备本发明促孕液的配方优选重量(份)配比范围是：

母液95-105、肝素0.003-0.004、咖啡因6-9、牛血清白蛋白0.35-0.45。

制备本发明促孕液的配方最佳重量(份)配比范围是：

母液100、肝素0.0035、咖啡因7.5、牛血清白蛋白0.4。

将上述各组分制成本发明促孕液的生产方法是：

1、按上述组分配比用精确度为十万分之一的电子天平称取原料后，将肝素、咖啡因、牛血清白蛋白放入干净消毒的容器中；

2、将母液倒入上述容器中，混合均匀；

3、过滤除菌，用孔径为0.22μm的过滤器过滤去除混均液中的杂质；

4、过滤后放入干净消毒的容器内，保存于4℃的冰箱中待用。

母液为浓度为0.9％的生理盐水或pH值为7.2-7.4的PBS缓冲液。

生理盐水：含有NaCl的生理盐水溶液。

PBS缓冲液(Phosphate Buffered Saline)

成分及配制方法：将NaCl 8.0g、KCl 0.2g、Na₂HPO₄·H₂O 1.56g、KH₂PO₄ 0.2g倒入盛有1000ml蒸馏水的烧杯中，混匀、消毒。

肝素钠(Heparin Sodium)它是一种生物活性较高的粘多糖，富含氨基硫酸基，是硫酸化程度最高的氨基葡聚糖(GAGS)。GAGS不仅在体内对精子获能和顶体反应起重要作用，而且能诱导牛附睾精子和射出精子的体外获能和顶体反应，肝素的硫酸根部分以硫酸酯形式存在，且可与氨基葡萄糖的氨基缩合，这就使肝素可与某些肽的活性氨基和糖蛋白的活性氨基结合，改变其构型和生化特性，达到消除抑制并激活受体酶的目的。

[药品名]肝素

[英文名]Heparinum

[来源]本品最初来自肝脏，故名肝素。现多是从猪、羊、牛等动物的肠粘膜或肝、肺中提取的一种粘多糖的硫酸酯。

[性状]为白色或类白色粉末；有引湿性。易溶于水。

[作用与用途]为体内外均能延长凝血时间的抗凝血药。其抗凝血作用极为复杂，对凝血过程的许多环节都有影响，其作用可通过几个方面：①抑制凝血致活酶的形成及作用，从而妨碍凝血酶原变为凝血酶；②在较高浓度时尚有抗凝血酶作用，使纤维蛋白原不能变为纤维蛋白；③能阻止血小板的凝集和破坏等。一般认为肝素的抗凝血作用与其分子中具阴电荷的硫酸根有关，具有阳电荷的碱性物质如鱼精蛋白或甲苯胺蓝都能中和其阴电荷，故能抑制其抗凝血作用。