[发明专利]As2O3联合TSA在制备诱导白血病HL60细胞由部分分化向终末分化转变的药物中的应用

说明书

技术领域

本发明属于医药生物技术领域。尤其涉及一种As₂O₃联合TSA在制备诱导白血病HL60细胞由部分分化向终末分化转变的药物中的应用。

背景技术

本发明涉及的下列名称适用于整个说明书和权利要求书：

BSA：牛血清蛋白(Bovine Serum Albumin)，Sigma公司产品；

As₂O₃：三氧化二砷(arsenic trioxide)，Sigma公司产品；

TSA：曲古霉素A(Trichostatin A)，Sigma公司产品；

MTT：溴化四甲基偶氮唑蓝[3-(4，5-dimthy-2-2thiazoly)2，5-dipheny-2H-tetrazoliunbromide]，Sigma公司产品；

DMSO：二甲基亚砜Dimethyl Sulfoxide，Sigma公司产品；

NBT：硝基四氮唑蓝(Nitroblue tetrazolium chloride)，Sigma公司产品；

PE-CD11b antibody：PE标记的小鼠抗人CD11b单抗购自美国Pharmingen公司；

HDAC：组蛋白去乙酰化酶(histone deacetylase)；

HAT：组蛋白乙酰转移酶(histone acetyltransferase)；

HDAI：组蛋白去乙酰化酶抑制剂(histone deacetylase inhibitor)。

人白血病细胞株HL-60：中国科学院典型培养物保藏委员会细胞库(供应商：中科院上海细胞库)。

1986年，我国学者首先应用全反式维甲酸(ATRA)诱导分化治疗急性早幼粒细胞白血病(APL)获得成功，开创了肿瘤治疗史上诱导分化治疗白血病最为成功的先例。1992年，我国学者再次发现应用三氧化二砷(As₂O₃)治疗急性早幼粒细胞白血病(APL)患者，缓解率也高达65％-98％。此后世界各国科学家在开发新的高效低毒分化诱导剂、诱导分化的分子作用机制、ATRA、As₂O₃耐药及临床治疗改进、非APL的诱导分化治疗方面研究都取得了较大进展。其中组蛋白去乙酰化酶抑制剂(histone deacetylase inhibitor，HDAI)作为一类新的分化诱导剂成为研究的热点。

诱导分化疗法是一种治疗恶性肿瘤的新方法，利用分化诱导剂可以使肿瘤细胞部分或全部恢复分化潜能，转变为正常细胞或导致细胞凋亡，从而达到治疗肿瘤的目的。与传统的细胞毒疗法相比，其目的不在于杀伤肿瘤细胞，因而具有较小的毒性。急性早幼粒细胞白血病(APL)是急性髓性白血病(AML)中的一个特殊亚型，临床以出凝血异常导致的出血为特征，血象常表现为白细胞不高，骨髓中颗粒增多的异常早幼粒细胞增多(占非红系30％以上)，细胞遗传学有特异性t(15；17)(q22；q21)，分子生物学可以检测到早幼粒细胞白血病-维甲酸受体α(PML/RARα)融合基因，及其转录本和融合蛋白。近半个世纪对APL的研究取得较大成果，随着从临床到基础，从基础到临床的不断反复，化疗、全反式维甲酸(ATRA)、三氧化二砷(As₂O₃)、新研发的分子靶向性药物成为APL治疗的4个里程碑，使得APL成为目前唯一仅通过药物即可治愈的恶性血液病，同时诱导分化治疗的成功也为其它肿瘤治疗提供了一条新的思路。但是，虽然以ATRA或As₂O₃为代表的急性早幼粒细胞白血病的诱导分化疗法在临床上取得了巨大成功，其他类型白血病的诱导分化疗法却进展相对缓慢。诱导分化成功的APL患者多数由于耐药形成而难以取得再次缓解。因此，寻找新型诱导分化剂和采用不同低剂量诱导分化剂的联合应用，成为增加诱导效果和减少耐药的重要途径。