[发明专利]PDCD4重组表达载体在制备治疗胶质瘤药物中的应用

说明书

技术领域

本发明涉及一种PDCD4重组表达载体的应用，尤其涉及一种PDCD4重组表达载体在制备治疗胶质瘤药物中的应用。

背景技术

(1)促进肿瘤细胞凋亡是当前抗癌新药研究的发展方向之一

目前，癌症在全世界人口死亡原因中排名第二，仅次于心脏病。以美国为例，2000年就有50万人死于癌症。传统抗癌药物大都属于细胞毒性药物，其临床疗效的高低往往取决于癌症细胞对药物的敏感性。传统抗癌药物的主要缺点包括：治疗窗相对较窄，对实体瘤效果较差，不良反应大，长期用药后易出现耐药性。

近年来的研究发现，某些参与细胞凋亡过程的基因在肿瘤细胞中的表达往往存在不同程度的缺陷，例如，BCL2基因和caspase酶系基因在大约三分之一的癌症中呈现过度表达。此外，某些细胞凋亡的调节基因，如p53基因，同样也与癌症的发生和发展有着千丝万缕的联系。

大多数与细胞凋亡过程有关的生物分子都不是类似于细胞表面受体这样的比较典型的药物作用靶位，因此，传统的干预措施，如小分子化学药物，都不能很好地调节细胞凋亡过程。不过，利用单克隆抗体和反义寡核苷酸等新治疗手段却可以做到这一点。其中，针对BCL2和p53基因开发的新型抗癌药物是近年来发展得最为迅速的几个品种。

1)BCL2基因反义药物：BCL2是位于线粒体外膜的膜蛋白。目前的研究显示，BCL2基因在多种人类恶性肿瘤中都呈现过度表达。专家指出，BCL2基因的过度表达可以抑制线粒体释放细胞色素C，阻止caspase-9酶和随后参与凋亡的其它关键酶的激活，从而抑制细胞凋亡过程；另有研究发现，BCL2还可以通过抑制由死亡受体Fas和Fas-L介导的caspase-8酶激活Bid(BCL2家族中的凋亡促进因子)过程，从另一条途径来抑制细胞凋亡。因此，人们认为，抑制BCL2基因在肿瘤细胞中的过度表达将会有助于促进肿瘤细胞的凋亡，有利于癌症的控制和治疗。反义药物是最早出现的一类BCL2基因治疗抗癌药物，它由反义寡核苷酸组成，可封闭BCL2基因的表达，促进肿瘤细胞的凋亡，同时增加与之合用的其他抗癌药物的临床疗效。奥利默森钠(Oblimersen sodium，G3139，商品名为Genasense)是Genta公司开发的一种反义药物，其成分为18基体硫代磷酸反义脱氧核苷酸，直接针对BCL2信使RNA(mRNA)开放阅读框的前6位密码子。大量各种细胞系的临床前研究表明，Genasense能诱导BCL2mRNA核苷酸序列特异性降解，从而抑制BCL2蛋白的表达。目前，Genta公司正与安万特公司合作，共同组织几项Genasense的III期随机临床试验，其适应证包括恶性黑素瘤、多发性骨髓瘤、慢性淋巴细胞性白血病(CLL)和非小细胞肺癌。2003年6月，美国食品药物管理局(FDA)同意将Genasense作为CLL治疗药物纳入快速审批通道。与此同时，Genta公司宣布，它将启动四项新的临床试验，以验证Genasense单独或联用其他抗癌药物治疗不同类型癌症的临床疗效。这四项临床试验包括，与干扰素合用治疗晚期肾癌的II期临床试验，单药治疗晚期Waldenstrom巨球蛋白血症的I/II期临床试验，与礼来公司的吉西他滨(健择)合用治疗晚期实体瘤(主要是胰腺癌)的I期临床试验，以及与CHOP-R标准化疗方案合用治疗晚期非霍奇金氏淋巴瘤的I期临床试验。在Genasense合并氮烯咪胺(dacarbazine)治疗恶性黑素瘤的I/II期临床试验中，患者用药5天后其BCL2表达的中位值就下降40％，核凋亡率也从治疗前的0.85％上升到3.17％，加用氮烯咪胺后更上升至19.4％；有57％的患者经治疗后病情得以稳定或有所改善，而作为对照的恶性黑素瘤标准治疗方案则只取得15％～20％的阳性反应率。在另一项Genasense与多西紫杉醇(泰索帝，安万特公司生产)合并治疗乳腺癌的I期临床试验中，7例可评价疗效的乳腺癌受试者中有2例达到临床缓解。业界人士认为，如果目前正在进行的几项关键性临床试验取得成功，Genasense将有望在2004年获准上市，从而成为首个上市销售的反义抗癌药物。此外，目前的资料显示，Genasense与其他抗癌药物合并治疗多种癌症时具有协同作用，因此，这种药物完全有可能成为许多BCL2过度表达的癌症的辅助治疗药物。据统计，每年在美国获准上市的抗癌新药的适应证，大约有三分之一属于BCL2过度表达的癌症。假定在这些患者中有一半左右会用Genasense进行治疗，而Genasense的平均治疗成本又假设为10,000美元/人，那么，Genasense在美国及全球的市场规模就会分别达到15亿和30亿美元。