[发明专利]气疽胰酶消化基

说明书

技术领域  本发明涉及一种气疽胰酶消化基，其主要成分是牛肉胰酶消化液、1∶2牛肉浸液、Na2HPO4·12H2O、磷酸二氢钾、活性炭(药用302型)、牛肉渣(新鲜洗净)、250g/L(葡萄糖溶液)。按比例混合经加温、溶解、混合、冷却、分装、高温灭菌等工艺而成。主要用于培养韦氏梭菌和脓毒梭菌，生产韦氏毒素和脓毒毒素，作高价免疫马的抗原，制抗韦氏和抗脓毒血清。生产的韦氏梭菌毒素和脓毒梭菌毒素应是免疫原性好的、高价免疫马的抗原，其血清效价韦氏梭菌不低于300IU/mL，脓毒梭菌不低于350IU/mL，培养基清澈，pH7.8-8.0，TN360-400mg/100mL，AN70％--90％。已有培养基剂品种很多，不具有切实可靠的方法；对培养成分有破坏作用，亦影响其物理性状。随着消毒研究的进展，国内外对培养基的研究也在不断的发展中。生物实验工作者一直希望能有一种能克服上述培养基不足的气疽胰酶消化基。

背景技术  本发明的目的在于提供一种能克服上述培养基不足的新型产品，用于培养韦氏梭菌和脓毒梭菌，生产韦氏毒素和脓毒毒素，作高价免疫马的抗原，制抗韦氏和抗脓毒血清。本发明的气疽胰酶消化基克服了上述的不足，快速检测诊断需氧菌和厌氧菌的生长，鉴别医疗产品消毒灭菌效果。方法简单，使用方便，结果可靠。

发明内容  本发明的要点在于选择合适的组分，并进行合理混配，经加温、溶解、混合、冷却、高温灭菌、分装、等工艺而成一种气疽胰酶消化基。

本发明选择的配方如下：牛肉胰酶消化液500-600mL；1∶2牛肉浸液500-600mL；Na2HPO4·12H2O5.0-5.5g；磷酸二氢钾3.0-3.5g；活性炭(药用302型)1.0-1.5g；牛肉渣(新鲜洗净)120-125g；250g/L(葡萄糖溶液)10-12mL。

韦氏梭菌属专性厌氧菌。此培养基中胰酶消化液、肉浸液供应细菌生长所需的氮源和生长因子。葡萄糖是还原剂，除供应碳源，还可吸收培养基中的氧气，保持厌氧环境。活性炭在培养基中起吸附作用，促进细菌生长，肉渣加强厌氧环境，在厌氧菌培养基中常被使用。此培养其亦可加入1％脱脂棉作厌氧菌培养效果理佳。

本发明产品的制备方法是：

(1).将胰酶消化液加温到80℃，用200g/L氢氧化钠溶液调至pH7.0-7.2。加入内浸液、磷酸氢二钠、磷酸二氢钾，煮沸10min后，再调pH，韦氏梭菌Ph为8.2-8.4，脓毒梭菌Ph为8.0-8.2，煮沸20min，过滤透明，分装于无菌瓶内；培养韦氏梭菌瓶中按12％加新鲜洗净牛肉渣，培养脓毒梭菌瓶中按0.1％加活性炭，113℃30min高压灭菌备用；

(2).配制250g/L葡萄糖，113℃30min高压灭菌，种菌前按1％(V/V)无菌操作加入。

本发明具有以下优点：气疽胰酶消化基克服了以往培养基的不足，能快速准确检测韦氏梭菌和脓毒梭菌的生长，生产韦氏毒素和脓毒毒素，作高价免疫马的抗原，制抗韦氏和抗脓毒血清。培养基清澈，方法简单，使用方便，结果可靠。

具体实施方式  下面结合实施例对本发明作进一步的详细说明：

按照下表所列数据(重量百分比％)及其所述步骤进行配置：

配方一：

胰酪蛋白胨                    7.5-8.0

植物蛋白胨                    3.8-5.0

葡萄糖                        5.5-6.0

氯化钠                        2.7-3.0

硫乙醇酸钠                    0.6-0.8

琼脂                          0.6---0.7

L-半胱氨酸                    0.6-0.8

刃天青(式亚甲基蓝)            0.01-0.02

蒸馏水                        加至100；(蒸馏水稀释至1000mL)。

                                                    

配方二：

胰酪蛋白胨                    7.5-8.0

植物蛋白胨                    3.8-5.0

葡萄糖                        5.5-6.0