[发明专利]一种检测子宫内膜异位症的方法和试剂盒无效
申请号: | 200710117960.6 | 申请日: | 2007-06-26 |
公开(公告)号: | CN101334410A | 公开(公告)日: | 2008-12-31 |
发明(设计)人: | 沙桂华;郎景和 | 申请(专利权)人: | 沙桂华;郎景和 |
主分类号: | G01N33/68 | 分类号: | G01N33/68;G01N33/50 |
代理公司: | 北京北新智诚知识产权代理有限公司 | 代理人: | 李超 |
地址: | 100730北*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 检测 子宫 内膜 异位症 方法 试剂盒 | ||
1.一种检测子宫内膜异位症的酶联免疫试剂盒,2~8℃避光保存,其组成如下:
(1)48或96孔聚苯乙烯板;
(2)GREM1小鼠单克隆抗体,Abnova公司;
(3)GREM1兔多克隆抗体,santa cruz公司;
(4)酶标抗体:辣根过氧化物酶标记羊抗兔IgG,santa cruz公司;
(5)GREM1标准品;
(6)包被液:pH 7.2、浓度为0.02mol/L的磷酸盐缓冲液PBS;
(7)10倍浓缩洗涤液PBST:pH 7.4、浓度1.5mol/L,将KH2PO4 0.2g、Na2HPO4·12H2O 2.9g、NaCl 8.0g、KCl 0.2g和TWeen-20 0.5ml溶于100ml蒸馏水;使用前 用去离子水10倍稀释至终浓度为0.15mol/L;
(8)封闭液:5%脱脂奶,将5g脱脂奶粉溶于100ml洗涤液PBST;
(9)抗体稀释液:0.5%脱脂奶,将0.5g脱脂奶粉溶于100ml洗涤液PBST;
(10)底物显色液:四甲基联苯胺10mg/5ml无水乙醇0.5ml,0.75%H2O2 32μl, pH5.5的底物缓冲液10ml,其中底物缓冲液的组成是:0.1M柠檬酸24.3ml,0.2M Na2HPO4·12H2O 25.7ml和50ml蒸馏水;
(11)终止液:2M H2SO4,向178.3ml蒸馏水中逐滴加入21.7ml浓度为98%的 浓硫酸得到该2M H2SO4溶液。
2.根据权利要求1所述的一种检测子宫内膜异位症的酶联免疫试剂盒,其特征在 于:所述(5)GREM1标准品为recombinant mouse GREM1,R&D公司。
3.根据权利要求1所述的一种检测子宫内膜异位症的酶联免疫试剂盒,其特征在 于:所述(5)GREM1标准品的浓度为0ppb、100ppb、200ppb、400ppb、800ppb 和1200ppb。
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